Generation of recombinant antibody libraries that facilitate highly sensitive monitoring of low molecular weight biomarkers

生成重组抗体文库，促进低分子量生物标志物的高灵敏度监测

• 批准号: 22590542
• 负责人: KOBAYASHI Norihiro
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kobe Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22590542/
• 关键词: バイオマーカー; モニタリング; 抗体; 抗体ライブラリー; 抗体工学; ライブラリー; エストラジオール; ジゴキシン

To generate high-performance scFv mutants that are specific to small biomarkers, we constructed a hapten- targeting scFv library based on a single master-frame of which VH and VL subgroups are those frequently used in anti-hapten antibodies. However, this library failed to yield any practical binder, suggesting that repeated trials are necessary to select suitable positions/patterns for mutagenesis. Thus, we decided to use streptavidin (stav) as a new scaffold, and generated a library of stav mutatants, each member of which has random mutations in their loop structures. After several rounds of selection, wefound mutant clones that gained binding abilities to estradiol or cortisol.

为了生成针对小生物标志物的高性能scFv突变体，我们基于单个主框架构建了一个半抗原靶向scFv文库，其中VH和VL亚群是抗半抗原抗体中经常使用的亚群。然而，该文库未能产生任何实际的结合剂，这表明需要反复试验来选择合适的突变位置/模式。因此，我们决定以链亲和素（streptavidin, stav）作为新的支架，并生成stav突变体文库，其中每个成员的循环结构随机突变。经过几轮选择，我们发现突变克隆获得了与雌二醇或皮质醇结合的能力。

项目成果

Ka値が30倍以上増大:"第3世代"変異抗エストラジオール抗体フラグメント

Ka值提升30倍以上：“第3代”突变型抗雌二醇抗体片段

• 发表时间: 2010
• 作者: Ihira M;Sugiyama H;Enomoto Y;Higashimoto Y;Sugata K;Asano Y;Yoshikawa T.;大山浩之,番園恵理佳,石井香好,寺本隆佑,小林典裕,太田光煕;Yoshikawa T;大山浩之,綺田尚久,山口修子,小林典裕;Kato Yuri;大山浩之,鈴木巌,安井孝治,小林典裕;Ihira Masaru;大山浩之,加藤芳徳,小林典裕
• 通讯作者: 大山浩之,加藤芳徳,小林典裕

部位特異的変異導入による抗コチニンscFvの試験管内親和性成熟の試み

尝试通过定点诱变实现抗可替宁 scFv 的体外亲和力成熟

• 发表时间: 2011
• 作者: 森田いずみ;大山浩之;渡部芳郎;平井杏奈;太田光熙;小林典裕;守川耕平,信川真智子,信川真貴子,信川京子,森田いずみ,清水香衣,小山淳子;森田いずみ,大山浩之,石井香好,渡部芳郎,太田光熙,小林典裕;森田 いずみ，大山 浩之，石井 香好，渡部 芳郎，太田 光熙，小林 典裕;守川 耕平，信川 真智子，信川 真貴子，信川 京子，森田 いずみ，清水 香衣，小山 淳子;大山浩之,寺本隆佑,宮岡広子,森田いずみ,小林典裕
• 通讯作者: 大山浩之,寺本隆佑,宮岡広子,森田いずみ,小林典裕

薬学用語辞典

医药术语词典

• 发表时间: 2012
• 作者: Shibata;H.;橘高敦史
• 通讯作者: 橘高敦史

Toward in Vivo Imaging of Heart Disease Using a Radio labeled Single-Chain Fv Fragment Targeting Tenascin-C

• DOI: 10.1021/ac202159p
• 发表时间: 2011-12-01
• 期刊: ANALYTICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 7.4
• 作者: Kobayashi, Norihiro;Odaka, Kenichi;Irie, Toshiald
• 通讯作者: Irie, Toshiald

実用診断試薬を創出する試験管内分子進化（6）．改良型scFvを用いるヒト尿中コチニンELISAの確立

体外分子进化创造实用的诊断试剂 (6)。

• 发表时间: 2013
• 作者: 桝田緑;正木浩哉;高橋伯夫;Ihira Masaru;森田 いずみ，大山 浩之，渡部 芳郎，平井 杏奈，太田 光熙，小林 典裕
• 通讯作者: 森田 いずみ，大山 浩之，渡部 芳郎，平井 杏奈，太田 光熙，小林 典裕