歯髄幹細胞特異的蛋白質の同定

牙髓干细胞特异性蛋白的鉴定

• 批准号: 22791855
• 负责人: 今林 貴代美
• 金额: $ 2万
• 依托单位: National Center for Geriatrics and Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22791855/
• 关键词: 歯髄幹細胞; プロテオミクス; 二次元電気泳動; バイオマーカー; 脱分化

本研究は、歯髄特異的蛋白質マーカーを同定することを目的として、歯髄形質を規定する歯髄特異的蛋白質を解析する。昨年度は歯髄幹細胞を脱分化させ、脱分化前後の細胞のプロテオミクスによる比較により歯髄特異的マーカーを得る予定であったが、脱分化の制御が困難であった。よって、本年度は、イヌ同一個体から幹/前駆細胞画分として歯髄・骨髄・脂肪CD31^-SP細胞を分取し、タンパク質可溶液をそれぞれ回収し、二次元電気泳動(等電点電気泳動およびSD-PAGE)を行い、蛍光染色後、歯髄に特異的に発現しているスポットを解析した。その結果、三者に共通して見られるスポットが434個(97.1%)であり、歯髄にのみ発現するスポットが3個存在した。さらに、その3個のスポットを切り出し、トリプシン処理後、脱塩、acetonitrile中で溶出し、Zip-Tip μC18で濃縮し、得られたペプチドをnano-LC/MSにてペプチド断片の質量を測定し、得られた結果をデータベースを用いPMF法により蛋白質を同定した。しかしながら、tropomyosin 3 isoform 2 isoform 5やgamma-enteric smooth muscle isoform 1 precursorなどの、特に歯髄に特異的とは考えにくい蛋白質が同定された。イヌは同一個体の細胞が同時に得られやすいが、データベースの充実に問題があることが判明した。よって、現在、ブタを用いた同様の実験を実施中である。

は, this study 歯 marrow specific protein マ ー カ ー を with fixed す る こ と を purpose と し て, 歯 marrow character を rules す る 歯 marrow specific protein を parsing す る. Yesterday annual は 歯 を marrow stem cells dedifferentiation さ せ の cells before and after, dedifferentiation の プ ロ テ オ ミ ク ス に よ る compare に よ り 歯 marrow specific マ ー カ ー を have る designated で あ っ た が, dedifferentiation の suppression が difficult で あ っ た. よ っ て, this year's は, イ ヌ same individual か ら 駆 cells before dry/draw points と し て 歯 marrow, bone marrow, fat CD31 を ^ - SP cells divide し, タ ン パ ク mass can solution を そ れ ぞ れ back 収 し, secondary yuan electric 気 swimming (isoelectric point electricity 気 swimming お よ び SD - PAGE) line を い, 蛍 light after dyeing, 歯 marrow に specific に 発 now し て い る ス ポ ッ Youdaoplaceholder0 parses た. そ の に results, three common し て see ら れ る ス ポ ッ ト が 434 (97.1%) で あ り, 歯 marrow に の み 発 now す る ス ポ ッ ト が exist three し た. さ ら に, そ の three の ス ポ ッ ト を り し, cutting ト リ プ シ ン 処 principle, salt, after で stripping し, Zip in acetonitrile - Tip Mu C18 で enrichment し, ら れ た ペ プ チ ド を nano - LC/MS に て ペ プ チ ド fragment の quality determination を し, ら れ た results を デ ー タ ベ ー ス を with い PMF method に よ を り proteins with fixed し た. し か し な が ら, tropomyosin 3 isoform 2 isoform 5 や gamma - enteric smooth muscle isoform 1 we な ど の, に 歯 marrow に specific と は exam え に く が い proteins with fixed さ れ た. イ ヌ は same individual が の cells while に ら れ や す い が, デ ー タ ベ ー ス の charge be に problem が あ る こ と が.at し た. Youdaoplaceholder0, now, ブタを uses the same method as た た in the <s:1> experiment を in the implementation である.

项目成果

CD105陽性幹細胞を用いた歯髄特異的タンパク質の検索

使用 CD105 阳性干细胞寻找牙髓特异性蛋白质

• 发表时间: 2011
• 作者: 今林貴代美;渡邉淳;庵原耕一郎;石坂亮;中島美砂子
• 通讯作者: 中島美砂子

Complete pulp regeneration after pulpectomy by transplantation of CD 105^+ stem cells with SDF-1

牙髓切除后通过用 SDF-1 移植 CD 105^ 干细胞实现牙髓再生

• 发表时间: 2011
• 期刊: Tissue Eng Part A
• 作者: ohara K;Imabayashi K;Ishizaka R;Watanabe A;Nabekura J;Ito M;Matsushita K;Nakamura H;Nakashima M
• 通讯作者: Nakashima M

歯髄CD105陽性細胞を用いた抜髄後歯髄再生法の確立

牙髓CD105阳性细胞拔牙后牙髓再生方法的建立

• 发表时间: 2010
• 作者: 庵原耕一郎;石坂亮;今林貴代美;江場久哲;松下健二;中村洋;中島美砂子
• 通讯作者: 中島美砂子

歯髄幹細胞を用いた抜髄後歯髄再生のタンパク化学的解析による証明

通过蛋白质化学分析证明牙髓干细胞拔牙后牙髓再生

• 发表时间: 2010
• 作者: 今林貴代美;庵原耕一郎;石坂亮;江波久哲;松下健二;中村洋;中島美砂子
• 通讯作者: 中島美砂子

歯髄組織再生におけるvimentinの作用

波形蛋白对牙髓组织再生的影响

• 发表时间: 2011
• 作者: 今林貴代美;庵原耕一郎;渡邉淳;石坂亮;中村洋;中島美砂子
• 通讯作者: 中島美砂子