A study of molecular mechanisms of assembly of the nuclear envelope-like membrane using DNA-beads incorporated into living cells

使用DNA珠整合到活细胞中组装核膜样膜的分子机制的研究

• 批准号: 22770205
• 负责人: KOBAYASHI Shouhei
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: National Institute of Information and Communications Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22770205/
• 关键词: DNAビーズ; 膜アセンブリー; Live CLEM; 異物認識; BAF; Live CLEM法

This research aims to investigate molecular mechanisms of assembly of the nuclear envelope(NE)-like membrane by utilizing DNA-beads incorporated into a living cell. We analyzed the timing of assembly of various cellular components on the DNA-beads using fluorescence microscopy and electron microscopy, and found that barrier-to-autointegration factor(BAF) appeared on the beads at very early timing after endosomal breakage. Removal of BAF with RNAi significantly reduced assembly of a nuclear envelope protein on the beads. Based on these results, we conclude that BAF is a critical factor for DNA-beads dependent NE assembly.

本研究的目的是探讨利用DNA微珠组装细胞核被膜（NE）样膜的分子机制。我们使用荧光显微镜和电子显微镜分析了各种细胞组分在DNA珠上组装的时间，发现内体断裂后，屏障-自整合因子（BAF）在非常早的时间出现在珠上。用RNAi去除BAF显著减少了珠粒上核膜蛋白的组装。基于这些结果，我们得出结论，BAF是一个关键因素的DNA珠依赖性NE组装。

项目成果

生細胞導入DNA結合ビーズによる細胞内膜系のアセンブリー

使用引入活细胞的 DNA 结合珠组装内膜系统

• 发表时间: 2010
• 作者: Hashimoto;M. and Hibi;M.;小林昇平
• 通讯作者: 小林昇平

人エビーズを用いた細胞の外来異物認識機構の解析

利用人体Ebies分析细胞异物识别机制

• 发表时间: 2012
• 期刊: 医学生物学電子顕微鏡技術学会誌
• 作者: 小林昇平;糀谷知子;小坂田裕子;森知栄;荒神尚子;平岡泰;原口徳子
• 通讯作者: 原口徳子

Visualization of endosomal escape of pH sensor-conjugated polystyrene beads by live CLEM(Live CLEM法によるpHセンサー結合ビーズのエンドソーム脱出過程の可視化)

通过活体 CLEM 可视化 pH 传感器共轭聚苯乙烯珠的内体逃逸过程（通过活体 CLEM 方法可视化 pH 传感器共轭珠的内体逃逸过程）

• 发表时间: 2010
• 作者: 小林昇平;糀谷知子;小坂田裕子;山本章嗣;吉森保;平岡泰;原口徳子
• 通讯作者: 原口徳子

生細胞導入ビーズを用いた細胞内膜アセンブリーの可視化

使用活细胞导入珠可视化细胞内膜组装

• 发表时间: 2010
• 作者: 伊藤多美子;前田礼男;松野健治;小林昇平
• 通讯作者: 小林昇平

細胞内での人工オルガネラの構築

细胞内人工细胞器的构建

• 发表时间: 2010
• 作者: Kikuchi Y;Takemoto H;Kuraoka A;Kenji Matsuno;Tanaka;小林昇平
• 通讯作者: 小林昇平