Development of genetic manipulation technology for excitatory and inhibitory control of the target neuron activity

开发用于靶神经元活动的兴奋性和抑制性控制的基因操纵技术

• 批准号: 22650065
• 负责人: KOBAYASHI Kazuto
• 金额: $ 1.68万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22650065/
• 关键词: 脳機能; 神経活動; 細胞標的法; 抗体; リポソーム; プロテオリポソーム

In the present study, we aimed to develop a novel technology for excitatory and inhibitory control of the activity of target neuronal types. A single chain variable region of anti-Tac monoclonal antibody against human interleukin-2 receptor a-subunit was fused to Fc fragment[anti-Tac(Fv)-Fc] was bound to liposome to produce immunoliposome. Anti-Tac(Fv) was connected to the transmembrane domain of vesicular somatitis virus glycoprotein or VSV-G[anti-Tac(Fv)-VSV-G], and anti-Tac(Fv)-VSV-G was expressed in insect cells by the baculoviral vector system. These cells were fused to loposome to generate proteoliposome containing anti-Tac(Fv)-VSV-G. We succeeded in the reduction of nonspecific binding of immunoliposome and proteoliposome by adding unlabelled control liposome into the solution containing the rhodamine-labelled liposome. This strategy will be useful to control the activity of neurons by introducing some drugs that inhibit ion channels into immunoliposome or proteoliposome.

在本研究中，我们的目标是开发一种对目标神经元类型的活动进行兴奋性和抑制性控制的新技术。将抗人白细胞介素2受体α亚基的抗Tac单克隆抗体的单链可变区与Fc片段融合[抗Tac(Fv)-Fc]与脂质体结合，产生免疫脂质体。将Anti-Tac(Fv)连接到水泡性鼻炎病毒糖蛋白或VSV-G的跨膜结构域[anti-Tac(Fv)-VSV-G]上，通过杆状病毒载体系统在昆虫细胞中表达anti-Tac(Fv)-VSV-G。这些细胞与脂质体融合，生成含有抗 Tac(Fv)-VSV-G 的蛋白脂质体。我们通过将未标记的对照脂质体添加到含有罗丹明标记的脂质体的溶液中，成功地减少了免疫脂质体和蛋白脂质体的非特异性结合。通过将一些抑制离子通道的药物引入免疫脂质体或蛋白脂质体，该策略将有助于控制神经元的活动。

项目成果

Controlled Genetic Manipulations

受控基因操作

• 发表时间: 2012
• 作者: Kobayashi;K.;et al
• 通讯作者: et al

道具的学習と行動制御を研究するモデル実験動物

用于研究工具学习和行为控制的模型实验动物

• 发表时间: 2010
• 期刊: 生体の科学 61
• 作者: 小林和人;他
• 通讯作者: 他

分子・細胞標的による脳疾患モデル研究

使用分子和细胞靶点进行脑疾病模型研究

• 发表时间: 2011
• 作者: 小林和人;ら;小林和人
• 通讯作者: 小林和人

A lentiviral strategy for highly efficient retrograde gene transfer by pseudotyping with fusion envelope giycoprotein.

通过融合包膜糖蛋白假型进行高效逆行基因转移的慢病毒策略。

• 发表时间: 2011
• 期刊: Hum.Gene Ther.
• 作者: Kato;S.;et al.
• 通讯作者: et al.

Rho/Rho-kinase signaling controls axon patterning of aspecified subpopulation of cranial motor neurons.

Rho/Rho 激酶信号传导控制特定颅运动神经元亚群的轴突模式。

• 发表时间: 2011
• 期刊: Eur.J.Neurosci.
• 作者: Kobayashi;K.;et al.
• 通讯作者: et al.