Protein dynamics during the photo reaction of rhodopsin studied with time-resolved step-scan FTIR-spectroscopy

使用时间分辨步进扫描 FTIR 光谱研究视紫红质光反应过程中的蛋白质动力学

• 批准号: 5401001
• 负责人: Professor Dr. Friedrich Siebert
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Molekulare Medizin und Zellforschung
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5401001?language=en
• 关键词: Protein; dynamics; during; photo; reaction

Die bestehende Step-Scan-FTIR-Apparatur soll durch einen IR-Mikroskop-Mikroilluminator und einem hochpräzisen Verschiebetisch erweitert werden, so dass zeitaufgelöste Step-Scan-FTIR-Messungen nicht-zyklischer Reaktionen von Filmproben durchgeführt werden können, indem nach jeder Anregung die Probe um einen kleinen Betrag verschoben wird. Abschätzungen zeigen, dass man mit ca. 1 mg Rhodopsin ein ausreichendes Signal/Rauschverhältnis mit einer Auflösung von 100 ns erzielen kann. Mit dieser Apparatur sollen dann die zeitaufgelösten Intermediate der Photoreaktion des Rhodopsins erfasst werden. Die Spektren sollen mit entsprechenden statischen Spektren verglichen werden, bei denen die Intermediate durch tiefe Temperaturen stabilisiert wurden. Von besonderem Interesse sind das BSI- und das MI380-Intermediat. Es werden vor allem Unterschiede in den Proteinbanden erwartet, was wichtige Informationen über die Proteindynamik liefert. Die Untersuchungen werden ergänzt durch Messungen an Rhodopsin das mit modifizierten Retinalen regeneriert wurde, bei denen die sterische Wechselwirkung mit dem Protein verändert ist. Es soll versucht werden, die durch die Modifikation veränderte Photoreaktion anhand der bekannten Struktur zu interpretieren. Auch hier spielen Abweichungen von Tieftemperaturspektren eine wichtige Rolle.

最好的步进扫描-FTIR-装置是通过一个IR-Mikroskop-Mikroilluminator和一个高精度的Versionebetisch韦尔登来实现的，所以步进扫描-FTIR-测量的时间不需要通过韦尔登来对胶片进行快速反应，而是通过将探针对准一个小的Betrag verschoben来实现。我先走了这人跟我一起。1 mg Rhodopsin ein ausreichendes Signal/Rauschverhältnis mit einer Auflösung von 100 ns erzielen kann.该仪器可用于快速韦尔登光反应的中间体。在中间温度稳定的情况下，可以使用韦尔登的静态扬声器。主要兴趣是BSI-和MI 380-中间体。这韦尔登对蛋白质组学中的所有不确定性都是最重要的信息。通过使用经修饰的Retinalen再生的视紫红质，可使韦尔登转化为蛋白质。这是因为韦尔登，通过修改可以使照片反应和结构变得清晰。此外，还可以在温度范围内测量一个很大的值。