Der Mechanismus des lichtgetriebenen Chloridtransports in Halorhodopsin von Natronobacterium ph. mittels statischer und zeitaufgelöster FTIR ATR-Spektroskopie

来自 Natronobacter ph 的盐视紫红质的光驱动氯离子转运机制。

基本信息

项目摘要

Die zeitaufgelöste Step-Scan FTIR-Spektroskopie soll auf die Untersuchung der molekularen Vorgänge beim Anion-Transport durch Halorhodopsin angewendet werden. Basierend auf in Vorarbeiten durchgeführten Messungen, bei denen allerdings die Anionenkonzentration nur grob eingestellt werden konnte, sollen nun Messungen unter genau kontrollierten Ionenbedingungen durchgeführt werden, da dieses die Photoreaktion sehr stark beeinflussen. Dabei muss ein Anionen-Konzentrationsbereich zwischen 0 und 10 M abgedeckt werden. Diese Untersuchungen sollen zeigen, wie die Anionen die Kinetiken der durch die zeitaufgelöste FTIR Spektroskopie identifizierten Intermediate beeinflußt, indem sie die Chloridbindungs- und -Abgabestellen besetzten bzw. freigeben. Da bisher in den Spektren eine nur geringe Beeinflussung der Banden identifiziert werden konnte, soll umgekehrt die Beeinflussung des Anions durch das Protein in den verschiedenen Intermediaten analysiert werden, indem das charakteristische IR-Banden aufweisende Nitrat as Anion verwendet wird. Weiter sollen globale Konformationsänderungen wie Helixbewegung bzw. Verzerrung die beim Chloridtransport ene wichtige Rolle spielen, durch zeitaufgelöste IR-Dichroismusmessungen identifiziert werden. Schliesslich sollen die molekularen Veränderungen bei der Chloridbindung im Dunkelzustand mit denen, die während der Photoreaktion stattfinden, verglichen werden. Mit den erzielten Ergebnissen sollen die Voraussetzungen und Vorhersagen verschiedener Modelle der Anionentranslokation überprüft werden.
分步扫描傅里叶变换红外光谱法用于研究盐视紫红质诱导韦尔登对阴离子转运的影响。基于在预处理过程中,由于阴离子浓度只有一个韦尔登值,所以在处理过程中,只有一个小值是通过韦尔登值控制的,这对光反应有明显的影响。大北必须有一个0和10米长的负离子交换器韦尔登。这些结果是确定的,因为通过红外光谱法鉴别中间体时,阴离子的动力学变化会影响氯的结合和吸收。免费的在本实验中,我们只对韦尔登识别带进行了初步的研究,结果表明,通过分析韦尔登中间体中的蛋白质,可以对阴离子进行识别,从而确定硝酸根作为阴离子的红外识别带的特征。Weiter sollen globale Konformationsänderungen wie Helixbewegung bzw.通过韦尔登鉴别氯离子的迁移,可以确定氯离子的迁移作用。Schliesslich sollen die molekularen Veränderungen bei der Chloridbindung im Dunkelzustand mit denen,die während der Photoraktion stattfinden,verglichen韦尔登.因此,我们可以用韦尔登的前体和前体模型进行验证。

项目成果

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