電離放射線損傷により誘導される損傷記憶と遅発性組み換えの制御機構の解析

电离辐射损伤损伤记忆与延迟复合控制机制分析

• 批准号: 22710057
• 负责人: 竹田 純
• 金额: $ 1万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22710057/
• 关键词: 放射線; 組換え変異; ゲノム修復

本研究課題は、電離放射線によるゲノム損傷の影響が損傷の修復完了後も被ばく細胞の子孫クローンに波及しつづけ、約10世代にわたって相同組み換え頻度が上昇したままになる「遅発性組み換え変異」の分子機構の解明を目標としている。平成22年度は、遅発性組み換え関連因子である相同組み換えタンパク質Rad52/Rad22の相互作用因子を同定し、それらに対する強制発現実験を通じてRad22の活性を直接あるいは間接的に調節する因子の検索を試みた。Rad22精製時に共沈してくるRNA種の同定に関しては、構成成分が非常に複雑で質量分析による同定が難航した。次世代シークエンサーを用いた網羅的な同定は可能と考えられるが、その後の候補因子をスクリーニングするプロセスに必要な時間に鑑み、タンパク質因子の研究に集中するよう方針を変更した。γ線照射の前後と照射後約6世代後の細胞からRad22とともに精製される相互作用タンパク質に大きな差は観察されなかった。そこで、Rad22との安定な相互作用が観察された10種の因子をRad22、Rti1とともに強制発現ベクターにクローニングし、おのおのの因子が引き起こす細胞の形態変化、相同組み換え頻度の変化、Rad22フォーカス形成率の変化を観察した。強制発現されたタンパク質がRad22を直接あるいは間接的に活性化すれば、細胞の伸長、組換え頻度ならびにフォーカス形成率の上昇が、抑制すれば逆の現象が起こるはずであり、実際に、表現型が予測と合致するRvb2とBag1が見出された。Rvb2の哺乳類ホモログTIP49はRad51活性化の上流で機能するという報告があることから、Rvb2が新規のRad22活性化因子である可能性は非常に高い。また、相同組み換えの抑制機構に関してはほとんど報告がないため、Rad22抑制因子と考えられるBag1の機能は非常に新規性が高く、今後の研究の広がりが期待される。

In this study, after the completion of the study, the radiation radiation system was affected by the disease, and about 10 generations of the same group of animals were tested in the same environment. The molecular institutions of the molecular organization have been able to understand the target of the disease. In the year of Pingcheng 22, we tested the interaction factors of Rad52/Rad22 in the same tissue in the same group. The interaction factors were determined in the same way, and the Rad22 activity was detected in the same way. Rad22 precision time is used to determine the same concentration of RNA and the components are very complex. The identity of the next-generation Internet users may be different from that of the next-generation network, and the waiting factors may be different from each other in the next generation. About 6 generations after gamma-ray irradiation, the cells were subjected to Rad22 irradiation, and the interaction was detected significantly. The interaction between radon 22 and diazepam is sensitive to Rad22, Rti1 and so on. The formation rate of rad 22 is higher than that of rad 22. It is necessary to increase the formation rate of the active Rad22, the cell growth, the growth of the cell, the formation rate of the temperature, and to restrain the effect of the negative effect on the temperature, the temperature and the surface of the Rvb2. Rvb2 mammalian TIP49 Rad51 activation upstream reports are highly likely to affect Rad22 activation factors in new regulations such as Rvb2. In recent years, the same group of organizations have reported that Rad22 inhibitors and Bag1 inhibitors have very high performance standards. Future research will be expected.