权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

親電子シグナル解除機構の解明

亲电子信号释放机制的阐明

基本信息

批准号：
22710209
负责人：
岩本典子
金额：
$ 2.5万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2011
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22710209/
关键词：
親電子物質親電子シグナル化学修飾 PTP1B/EGFRシグナル

项目摘要

親電子物質はタンパク質の求核基と共有結合する性質を有している。親電子物質に修飾されるセンサータンパク質の中でも、活性部位に反応性の求核基を有するタンパク質は親電子物質によってその活性を制御される。これまでに、我々はプロテインチロシンホスファターゼ1B(PTP1B)が、大気中に存在する親電子物質1,2-ナフトキノンのセンサータンパク質であることを明らかにした。PTP1Bは上皮成長因子受容体(EGFR)のリン酸化を負に制御することで、生体恒常性を制御しているタンパク質であり、活性部位には反応性の求核基(システイン残基)を有する。一方、生体内においても多種の親電子物質が産生されており、そのひとつがニトロ化を受けると親電子性を有する脂肪酸となるニトロ化オレイン酸(OA-NO_2)である。本研究では、このPTP1B/EGFRシグナルが生体内の親電子物質であるOA-NO_2に対してもセンサーとして働くか否かを明らかにすることを目的とした。OA-NO_2をA431細胞に曝露すると、濃度依存的に細胞内PTPsの活性が低下し、EGFRの自己リン酸化が亢進し、EGFRの下流のシグナル伝達因子であるERK1/2のリン酸化も増加した。PTP1Bの精製酵素にOA-NO_2を曝露すると、OA-NO_2の濃度依存的にPTP1Bへの結合及び活性阻害が促進された。MALDI-TOF/MS分析した結果、OA-NO_2のPTP1B結合部位がCys215およびHis54であることが明らかとなった。以上より、内在性親電子物質であるOA-NO_2はPTP1Bの活性部位Cys215に結合し、本酵素活性を阻害することで、EGFRの自己リン酸化に伴う親電子シグナル伝達経路の活性化を引き起こすことが示唆された。

Electrophiles have the properties of nuclear and nuclear binding. Electrophiles modify the nucleus of the molecule and inhibit the activity of the molecule. The electrophile substance 1,2-PtP PTP1B is responsible for controlling the acidification of epidermal growth factor receptor (EGFR), controlling the homeostasis of EGFR, and determining the nucleotide residues of EGFR in the active site. A variety of electrophilic substances are produced in the body, such as fatty acids, fatty acids The purpose of this study is to investigate the relationship between PTP1B/EGFR and electrophiles in vivo. In A431 cells exposed to OA-NO_2, the activity of intracellular PTPs decreased, EGFR phosphorylation increased, EGFR down-stream phosphorylation increased, and ERK1/2 phosphorylation increased in a concentration-dependent manner. OA-NO_2 exposure, OA-NO_2 concentration-dependent binding and activity inhibition of PTP1B purification enzyme were promoted. MALDI-TOF/MS analysis results, OA-NO_2 and PTP1B binding site Cys215 As described above, OA-NO_2 binds to the active site Cys215 of PTP1B, inhibiting the activity of EGFR, and activating the pathway of EGFR itself.