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無尾両生類の多様な水適応を引き起こすアクアポレーション制御機構

导致无尾两栖动物多样化水适应的水化控制机制

基本信息

批准号：
23370028
负责人：
田中滋康
金额：
$ 6.24万
依托单位：
Shizuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23370028/
关键词：
無尾両生類アクアポリン水バランス調節浸透圧尿素回路

项目摘要

水チャネルアクアポリン(AQP)の発現および生体内浸透圧調節機構に着目し、多様な生息環境に分布する無尾両生類の水バランス維持機構に関する下記の研究を行った。1)ツメガエルにおける窒素代謝変換機構:減水環境で飼育したネッタイツメガエル肝臓中のアルギナーゼ(ARG)及びアルギノコハク酸リアーゼ(ASL)のmRNA発現が水中飼育群と比較して顕著に増大すること、血中サイロキシン(T_4)濃度く下垂体中の甲状腺刺激ホルモン及び視床下部中の副腎皮質刺激ホルモン放出因子mRNAの発現が上昇することを明らかにした。さらに肝臓細胞にT_4を添加して培養すると、ARGとASLのmRNA発現が増大することを明らかにし、減水時には視床下部-下垂体-甲状腺系が活性化し、その作用で尿素の合成が促進されることが示された。2)Rana属における新規腹側皮膚型AQPの同定:Rana属の3種のカエル下腹部皮膚より、既に知られていた腹側皮膚型とは異なるタイプのAQPのcDNAをクローニングした。系統解析により、これらのAQPは樹上棲・陸棲のカエルの腹側皮膚型AQPと同じクラスターに属し、一方で以前から知られる腹側皮膚型AQPは水棲カエルの腹側皮膚型AQPと同一のクラスターに属することが明らかとなった。またこれらのAQPが下腹部皮膚最外顆粒細胞層の主細胞に発現していること、その局在が抗利尿ホルモンにより調節されることなどを明らかにした。3)ネッタイツメガエルAQP-xt5'の機能:ネッタイツメガエルの機能未知のAQP(AQP-xt5')のcDNAクローニングを行い、その配列に基づき特異的ペプチド抗体を作製した。免疫蛍光染色の結果、AQP-xt5'は下腹部皮膚の顆粒腺分泌細胞および膀胱上皮の顆粒細胞の細胞質において発現していることがわかった。このAQPのmRNA発現は、減水または高浸透圧条件で飼育することで増加した。

The development of aquaporin (AQP) and the mechanism of osmotic pressure regulation in organisms were studied. 1) Mechanism of hormone metabolism: mRNA expression of ARG and ASL in the liver under reduced water condition increased in comparison with that in the water group. The mRNA expression of ARG and ASL increased when T_4 was added to liver cells, and the activity and synthesis of urea in the hypothalamic-pituitary-thyroid system increased when T_4 was reduced. 2) The identification of AQP in the genus Rana: 3 species of Rana have been identified in the genus Rana, and 3 species of Rana have been identified in the genus Rana. System Analysis: Both arboreal and terrestrial AQP and ventral skin-type AQP belong to the same group, and both previously known ventral skin-type AQP and aquatic AQP belong to the same group. The AQP was found in the main cells of the outermost granular cell layer of the lower abdominal skin. 3) Function of AQP-xt5': The cDNA library of AQP(AQP-xt5') with unknown function is in operation, and the specific selection antibody of AQP(AQP-xt5') is produced. Immunohistochemical staining results, AQP-xt5'and lower abdomen skin granular gland secretory cells, bladder epithelial granular cells cytoplasmic development, development The expression of AQP mRNA was increased under high osmotic pressure conditions.