Laser microdissection-assisted analysis of ligninication and related gene expression in the microstructure of woody lignifiying cells

激光显微切割辅助分析木质化细胞微观结构中的木质化及相关基因表达

• 批准号: 23380102
• 负责人: TSUTSUMI YUJI
• 金额: $ 11.98万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23380102/
• 关键词: リグニン; 生合成; 遺伝子; 発現解析; 微細組織; レーザーマイクロダイセクション; Py-GC/MS; 生合成中間体; 酵素遺伝; 転写解析; 構造解析; 微少細胞

The cells were collected from the different stages of lignification or different organs by a laser micro-dissection (LMD) technique and were subjected to the analyses of lignin structure and gene expression.Transcriptions of the lignification related genes were analyzed by Real-time PCR. COMT, CCoAOMT, and CAD, were transcribed prior to lignin deposition. The transcription levels of CCR and 4CL were lower than them. CCR stands in the lignification specific pathway; therefore it is considered to be a regulatory gene in the lignin biosynthesis. The lignin structure analysis was achieved with only 0.1 square millimeter samples as a minimum requirement by the combined LMD and Py-GC/MS. The results indicated that syringyl lignin is synthesized in the beginning of lignification, and that structural changes of lignification still proceeds even in the area in which lignification seems already completed by the histochemical observations.

采用激光显微切割（LMD）技术从不同木质化阶段或不同器官中采集细胞，分析木质素结构和基因表达，并采用Real-time PCR技术分析木质化相关基因的转录。COMT、CCoAOMT和CAD在木质素沉积之前转录。CCR和4CL的转录水平较低。CCR基因位于木质化特异性途径中，因此被认为是木质素生物合成的调控基因。木质素结构的分析，实现了只有0.1平方毫米的样品作为最低要求的LMD和Py-GC/MS相结合。结果表明，在木质化的开始，合成的木质素，木质化的结构变化仍然进行，即使在该地区的木质化似乎已经完成了组织化学观察。

项目成果

リグニンの高分子化を担う植物ペルオキシダーゼの酸化能と酸化機構

负责木质素聚合的植物过氧化物酶的氧化能力和机制

• 发表时间: 2014
• 作者: 重藤 潤;堤 祐司
• 通讯作者: 堤 祐司

CWPO-Cの転写およびプロモーター解析

CWPO-C的转录和启动子分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 大平 香織;Kasturi Banerjee;重藤 潤;堤 祐司
• 通讯作者: 堤 祐司

リグニン高分子化ペルオキシダーゼの反応特性

木质素聚合过氧化物酶的反应特性

• 发表时间: 2013
• 作者: 堤 祐司;重藤 潤;長野 万里子
• 通讯作者: 長野 万里子

CWPO-C の転写およびプロモーター解析

CWPO-C的转录和启动子分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 大平 香織;Kasturi Banerjee;重藤 潤;堤 祐司
• 通讯作者: 堤 祐司

Laser microdissection を用いたリグニン不均一性制御機構の解明

利用激光显微切割阐明木质素异质性的控制机制

• 发表时间: 2013
• 作者: 和田 卓;藤田 弘毅;堤 祐司
• 通讯作者: 堤 祐司