肺がんで高発現している非コードRNA・MALAT－1の機能解析

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古典的な非コードRNAであるtRNAは核で転写によって作り出された後、細胞質へと移動し、そこでアミノ酸をリボソームへと運搬し、翻訳に寄与します。近年の様々な研究において、tRNAは核から細胞質への一方通行ではなく、核と細胞質問をシャトリングしているということが見いだされてきています。また、ストレス下において、tRNAが核か細胞質のどちら一方に積極的にあつまるということもわかってきています。私はこれまで、tRNAが熱ストレス条件下で細胞質から核へと積極的に移行するということをヒト細胞で初めて発見しました。また、それに伴い、核内において特異的なグラニュールを形成するということも初めて発見しました。このtRNAのグラニュールが核ストレス体と重なるところまでを私は見いだしましたが、どういった様式で核ストレス体にtRNAが局在するのかは不明です。また、核ストレス体はストレス時に特異的に形成される構造体で、DNA損傷に関わると考えられていますがまだ詳しいメカニズムはわかっていません。そこで私は、tRNAが核ストレス体に局在するメカニズムがDNA損傷の生理機能の一端を担っているのではないかと考え、核ストレス体にtRNAがどのように局在するのか調べることを研究目的にしました。まず熱ストレスをかけたヒト培養細胞において核ストレス体に集まると考えられているタンパク質とtRNAのグラニュールが重なるかを蛍光in situ hybridization (FISH)法で確認しました。その結果いくつかのタンパク質の蛍光シグナルとtRNAグラニュールのシグナルが重なることが見いだされました。また、これらのタンパク質をノックダウンした時にtRNAが核ストレス体に集まってくるのか否かを同様にFISH法で調べましたが、こちらの実験では顕著な変化が見られませんでした。