hTERTによるがん性幹細胞維持機構の解析

hTERT分析癌干细胞维持机制

• 批准号: 11J05491
• 负责人: 岡本 奈緒子
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J05491/
• 关键词: テロメレース; がん性幹細胞; Nucleostemin(NS); BRG1; GNL3L; 卵巣がん; RdRp活性; がん幹細胞

テロメレースの触媒サブユニットであるhTERTがテロメレース活性以外の新規機能を持つ可能性が示唆されていることから、hTERTの新規結合因子の同定とその複合体の生物学的意義の解析を本研究の目的とした。申請時までにhTERTの新規結合タンパク質として核小体GTP結合タンパク質であるNSとそのファミリータンパク質であるGNL3L、クロマチンリモデリング複合体構成タンパク質であるBRG1を同定し、このhTERT新規複合体により、がん幹細胞形質ががん細胞に付加されることを見出していた。そこで本年度の研究では、(1)hTERT新規複合体によるがん幹細胞維持機構のメカニズムの解明、(2)臨床検体を用いたhTERT新規複合体によるがん幹細胞維持機構の解析を研究課題とし実験を行った。(1)の研究課題では具体的に、新規に作製した抗hTERT抗体を使用しIFを行ったところ、11TERTが分裂期の細胞において紡錘糸に局在することを見出したため、紡錘糸が結合する染色体領域であるセントロメアのDNA配列であるAlphoidとヒトのDNAの多くを占めるhHNE1に注目し研究を行った。2009年には転写したRNAと精製したhTERTを使用してRdRp活性を確認するRdRp assayを確立していたが、新しく細胞抽出液を使用したIP-RdRp assayを確立し、上記AlphoidとhLINE1から転写されたRNAがhTERTのRdRp活性の基質となることを見出した。またAlphoid及びhLINE1から転写されるRNAの発現量と同領域のヒストンのメチル化状態が比例することから、hTERTのRdRp活性はヘテロクロマチン状態の形成または維持に関与する可能性が示唆された。(2)の研究課題では、現在までに見出したhTERT新規複合体によるがん幹細胞維持機構を臨床に応用するため、手術検体を用いた解析を行った。独立行政法人国立がん研究センター中央病院婦人腫瘍科との共同研究を行い、卵巣がん、卵管がん、腹膜がんの手術検体を収集し、hTERT複合体構成因子及びがん性幹細胞マーカーの発現解析を行った。その結果、hTER新規複合体の構成因子であるNSとBRG1が共発現しており、ヒトの卵巣腫瘍においてBRG1とNSが複合体を形成し、機能している可能性が示唆された。

The purpose of this study is to analyze the biological significance of the complex of hTERT binding factors and hTERT binding factors. When applying for hTERT new regulation binding protein, NS-bound nucleosome GTP binding protein, NS-bound nucleosome GNL3L, NS-bound nucleosome GTP binding protein, NS-bound nucleosome GNL3L, NS-bound nucleosome GTP binding protein, NS-bound nucleosome GNL3L, NS-bound nucleosome GNL This year's research is aimed at: (1) understanding the mechanism of stem cell maintenance by hTERT new regulation complex;(2) analyzing the mechanism of stem cell maintenance by hTERT new regulation complex in clinical application. (1)The research topic is to study the use of anti-hTERT antibodies in the field of chromosome DNA alignment in the field of spindle DNA alignment in the field of cell division. In 2009, the RdRp assay was established for RNA purification and the RdRp assay was established for RNA purification and the RdRp assay was established for RNA purification. Alphoid and hTERT 1 mRNA expression and the proportion of the same domain's RNA expression and the formation of the same domain's RNA expression and hTERT's RdRp activity indicate the possibility of maintaining the same domain. (2)The research topic is to analyze the clinical application of stem cell maintenance mechanism and surgical model. Joint Research on Female Oncology Department of the National Institute of Public Health, National Institute of Public Health As a result, the possibility of the formation and function of the BRG1 and NS complex was demonstrated.

项目成果

卵巣がんの組織型におけるがん幹細胞関連遺伝子の発現検討

卵巢癌组织学中肿瘤干细胞相关基因表达的检测

• 发表时间: 2012
• 作者: 岡本奈緒子;他
• 通讯作者: 他