精巣胚細胞腫瘍を利用した脱メチル化因子の同定

利用睾丸生殖细胞肿瘤鉴定去甲基化因子

• 批准号: 11J07368
• 负责人: 奥山 佳ほり (南 佳ほり)
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: National Research Institute for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J07368/
• 关键词: DNMT3L; 胎児性癌細胞株; 多分化能; iPS細胞

今年度は、microRNA-371-373 (miR-371-373)クラスターに着目し、ヒト胎児性癌細胞とヒトiPS細胞における発現動態について調べた。ヒト胎児性癌細胞株3ライン、ヒトips細胞株7ラインと、ヒト体細胞株3ラインを用いて、ヒトES細胞特異的miRNAであるmiR-371-373クラスターの発現アレイ解析を行い、発現パターンを比較した。その結果、miR-371-373クラスターの全てのmiRNAsは、ヒトiPS細胞株群に比べ、ヒト胎児性癌細胞株群において顕著に高い発現レベルを示した。この結果を受け、Feeder freeのヒトiPS細胞株であるEdom2#8を用いてmiR-371を安定に発現するEdom2#8-LV371細胞を樹立した。Edom2#8-LV371細胞株とEdom2#8細胞株を用いて、miR-371が細胞周期へ及ぼす影響を調べるためにCell cycle assayを行った。その結果、Edom2#8細胞に比べて、Edom2#8-LV371細胞では大変ユニークなCell cycleパターンを示していた。またこのCell cycleパターンは、胎児性癌細胞株であるNCR-G2細胞において見られたパターンと非常に似ていた。ヒト胎児性癌細胞株におけるヒトES細胞特異的miR-371-373クラスターの非常に高い発現や、Cellcycle assayで示された特異的なパターンは、ヒトiPS細胞、ヒトES細胞とは異なる胎児性癌細胞特異的な発現動態である可能性があり、胎児性癌細胞の新たな特徴を見出したと考えられる。また、miR-371を強制発現させたヒトiPS細胞株はCell cycle assayで胎児性癌細胞株と似た動態パターンを示したことから、miR-371によってヒトiPS細胞株が胎児性癌細胞株に似た性質を示すようになった可能性が考えられた。

In this year, microRNA-371-373 (miR-371-373) is involved in the development of fetal cancer cells and iPS cells. Human fetal carcinoma cell line 3, human ips cell line 7, human somatic cell line 3, human ES cell-specific miRNA analysis and comparison of miRNA expression The results showed that miRs of miR-371-373 were highly expressed in iPS cell lines compared with those in fetal cancer cell lines. As a result of these results, Edom2#8-LV371 cells were established in the Feeder free iPS cell line using Edom2#8 to stabilize miR-371. Edom2#8-LV371 cell line was used to regulate cell cycle and cell cycle assay. Edom2#8-LV371 cells were found to have a large Cell cycle. The cell cycle is very similar to that of NCR-G2 cells. A very high level of miRs-371-373 specific to fetal cancer cell lines, Cellcycle assays, and iPS cell and ES cell lines was detected. MiRs-371 stress induced iPS cell lines to develop fetal carcinoma cell lines. Cell cycle assay. Dynamic analysis. MiRs-371 stress induced iPS cell lines to develop fetal carcinoma cell lines.