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魚類卵子の凍結保存・体外成熟

鱼卵的冷冻保存和体外成熟

基本信息

批准号：
11J07491
负责人：
関信輔
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Tokyo University of Marine Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2013
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は小型魚類を対象とした魚類遺伝資源の保存である。平成23,24年度の研究により、メダカ精巣のガラス化保存と移植精原細胞由来の配偶子のみを生産する不妊三倍体宿主(代理親)の作出に成功し、絶滅危惧種である野生地域集団(東京めだか)を保全する事にも成功した。平成25年度では、全ゲノム配列解読が完了している研究上有用な近交系(Kaga)についても、本技法が応用可能かどうかを調べた。また、メダカには、wnt4への挿入変異により、脊椎が正常に形成されずに、体型が肥満体型になるために正常な交配ができない系統(ダルマメダカ)が存在する。そこで、遺伝的に妊性が低い系統であっても、体型が正常な系統を代理親に用いる事で大量生産可能かどうかを検証した。近交系(Kaga、クロメダカ)の精原細胞含む精巣を凍結融解し、それら精巣細胞を代理親(vasa-GFP緋メダカ)へ移植したところ、代理親はドナー由来のハプロタイプを示す次世代のみを得ることに成功した。さらに、ゲノム解析を行ったところ、ドナーとして使用したKagaと同一であることが確認された。全ゲノム配列が解読されており、研究上重要な近交系の生殖細胞の凍結保存と個体作出に成功した。また、低妊性系統であるダルマ体型メダカについても、正常な体型をしたクロメダカを代理親に用いる事で大量生産することに成功した。ダルマメダカ同士の交配では受精率は低かったが(16/157、10.2%)、正常な体型のクロメダカを代理親に用いることでその受精率は112/144 (79.4%)へと大幅に改善された。また、宿主には、不妊三倍体を用いる事で、それらすべての次世代はドナー由来であることを確認した(231尾中231尾)。代理親魚技法を用いることにより、研究上重要であるにも関わらず、継代することが困難な系統でも、生殖細胞さえ正常であれば大量生産することが可能である。

The purpose of this study is to preserve the resources of small-scale plants, such as those of other countries. In the year of Pingcheng 23pi 24, the origin of transplanted spermatogonia was studied and preserved. The triploid host (surrogate) was successfully preserved in the wild area collection (wild area collection). After the completion of the research on inbred lines (Kaga) in Pingcheng 25, it is possible to use this technique. The baby, the baby, the wnt4, the normal spine, the normal body, the normal mating, the normal mating and the normal mating. Pregnant women, pregnant women with low pregnancy, normal body size, normal body size, low pregnancy, low pregnancy, pregnancy The spermatogonia of inbred lines (Kaga, inbred lines) contain spermatogonia, sperm cells, inbred lines, inb Please check, parse the line, and use the same Kaga to confirm the error. All the inbred lines and reproductive cells of the most important inbred lines were successfully preserved. The pregnancy, low pregnancy rate, low pregnancy rate, low pregnancy, low pregnancy and normal pregnancy. The fertilization rate was lower than that of the control group (16,157,10.2%), and the normal somatotype was significantly improved with the fertility rate of 112ppm 144 (79.4%). The causes of pregnancy, host, triploid, non-pregnancy triploid, pregnancy, host, triploid, triploid, triplo Surrogate techniques are used in many fields, such as research, research, system problems, reproductive problems, and the possibility that a large number of people may be affected.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

凍結保存後のマウス胚の生存性は融解速度に支配される

冷冻保存后小鼠胚胎的活力受解冻速率控制

DOI：
发表时间：
2011
期刊：
影响因子：
0
作者：
Shinsuke Seki;Seungki Lee;Yoshiko Iwasaki;Tadashi Hiratsuka;Kaunari Kusano;Sumie Endo;Takao Sasado;Kiyoshi Naruse;Goro Yoshizaki;関信輔
通讯作者：
関信輔

生殖細胞のガラス化保存と代理親魚技法による凍結細胞由来の個体作出に関する技術開発

生殖细胞玻璃化保存和使用替代亲鱼技术从冷冻细胞产生个体的技术开发