マクロファージの機能特性に基づいた胆管線維症の病理発生の解明と治療戦術

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胆管線維症は、胆汁うっ滞や自己免疫などの原因により惹起される胆管上皮細胞の傷害に続発する慢性増殖性炎で、増悪すれば肝硬変に至る。2年間の研究で、昨年までに(1)ラット肝発生に伴うマクロファージの動態(ラット肝組織におけるマクロファージの分布を調べる基礎データの確立)、(2)alpha-naphthylisothiocyanate (ANIT)による急性と慢性の胆管線維症のラットモデルの病態解析(胆管上皮傷害後に出現するマクロファージ群の動態解析)、(3)牛肝蛭症におけるマクロファージの特性解析(自然発生例の胆管傷害病変の解析)の3点について検討してきた。今年度は、以下の二つのマクロファージ枯渇(機能抑制)実験を行った。1. ANIT胆管線維症モデルにおけるマクロファージの機能抑制実験 : ANITをラットに投与し、胆管線維症モデルを作出した。このモデルに、マクロファージの機能を抑制するクロドロネートリポソームを投与し、その病態の解析を行った。免疫組織化学的に、Iba-1(走化因子)、CD68(貪食活性)、CD163(炎症性因子産生)、MHCクラスII(抗原提示能)、CD204(スカベンジャーレセプタータイプA ; 脂質活性の指標)、ガラクチン-3(筋線維芽細胞の活性化)を発現するマクロファージが、クロドロネードの投与により減少し、その結果ビメンチン、デスミン、α-平滑筋アクチンを発現する筋線維芽細胞の出現が抑制された。すなわち、ANIT傷害により胆管周囲に生じる線維化の形成がマクロファージの枯渇により延長した。2. チオアセトアミド(TAA)誘発肝細胞傷害におけるM1/M2マクロファージ分極化と枯渇実験 : マクロファージは、近年、貪食活性を有する古典的M1マクロファージと、組織修復に関わる修復性M2マクロファージに分けられる。小葉中心性の肝細胞傷害を有するTAAをラットに投与し、出現するマクロファージの特性を、M1/M2分極化の観点から解析した。組織傷害が出現していない極めて初期のステージにおいて、M1マクロファージ関連因子(INF-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6)が増加し、かつM2マクロファージ誘導に関わるIL-4もこの時点で増加していた。その後、数日遅れてM2マクロファージから産生されるIL-10やTGF-β1が増加した。クロドロネートの投与により、CD68発現M1マクロファージやCD163発現M2マクロファージの出現が抑制され、線維化による病変の回復が遅延した。