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多孔性物質を用いた光駆動型一酸化窒素リリースシステムの構築

使用多孔材料构建光驱动一氧化氮释放系统

基本信息

批准号：
12J01634
负责人：
金致源
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

今研究では一酸化窒素を放出するPCPであるNOF (Nitric oxide releasing framework)を用いて細胞への一酸化窒素刺激を試みた。まず、表面をPEI (polyethyleneimine)で修飾したNOFと表面修飾していないNOFを分散した細胞培養液でT２４細胞を２４時間培養後、二つのサンプルの違いを確認した。TEM (透過電子顕微鏡)で細胞の表面と断面を確認した結果、その二つのサンプルの違いが現れた。PEI-NOFと培養した細胞は細胞の表面と細胞接着タンパク質だと思われる紐のようなものがNOF結晶とつながっていて、細胞がNOFを取り込む様子が観察された。しかし、表面修飾していないNOFからはそれが観察できず、PEI-NOFが細胞に取り込みやすいと思われる。PEI-NOFと培養した細胞の断面をTEM見ると、endosomeの中からNOFの結晶が観察され、細胞に取り込まれていることを確認した。さらに共焦点レーザー顕微鏡のZ軸scanでPEI-NOF結晶が細胞に中に入っているのを確認した。このように細胞内にPEI-NOFが存在することを確認して、細胞刺激実験を行った。PEI-NOFを入れて培養した細胞に光を当てて細胞内からの一酸化窒素放出を確認するため、細胞内一酸化窒素検出色素であるDAF-FMを利用した。細胞をPEI-NOFとともに２４時間培養後、PBSで洗って細胞外にあるPEI-NOFを除去する。その後、共焦点レーザー顕微鏡を使って一つの細胞にUV (405 nm)を当てるとその細胞のみが蛍光見せて一酸化窒素を吸収したことをします。これで光で一酸化窒素を放出するPCP (NOF)を合成し、細胞内に導入し、細胞内から一酸化窒素を出す実験に成功した。

In this study, PCP asphyxiate was released and NOF (Nitric oxide releasing framework) was used to stimulate the test mice. PEI (polyethyleneimine), surface trimming, NOF, surface trimming, NOF dispersion, cell culture, T24, cell culture, incubation, temperature, temperature and temperature. TEM (via electronic micrometer) to verify the results of the cell surface cross-section, and then to verify the results. On the surface of the cell, the PEI-NOF cell is divided into two parts: the cell, the cell, the Surface trimming, surface trimming, NOF dressing, surface trimming, PEI-NOF trimming, surface trimming, and surface trimming. The cross-section of the PEI-NOF cell was examined by TEM, the NOF crystal in the endosome was checked, and the cell was checked by the cell. In a confocal point, you need to confirm that you are in the cell of the scan PEI-NOF. There are intracellular PEI-NOF confirmation and cellular stimuli in the cell. When PEI-NOF was added to the cell, the asphyxiated asphyxia acidulated was released, the pigment was released from the acidulated asphyxiate, and the pigment was produced by DAF-FM. After incubation for 24 hours, PEI-NOF cells were incubated for 24 hours, and then PBS was washed and extracellular PEI-NOF was used to remove the cells. After the exposure, the confocal device is used to make a cell called UV (405 nm), which is sensitive to the presence of acid asphyxiant. PCP (NOF) synthesis, intracellular uptake, intracellular release and successful release of monoacid asphyxiant were detected.