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hATトランスポゼースファミリーによる新しい細胞移動停止の制御機構

hAT 转座酶家族抑制细胞迁移的新型控制机制

基本信息

批准号：
12J02384
负责人：
菊地哲宏
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kwansei Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至 2013
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J02384/
关键词：
MIG-39 DTC DREF 低分子量G蛋白質 migration tip cell mig-24/HLH mig-39 overshoot

项目摘要

1. MIG-39の発現部位の解析MIG-39の303aaから470aaを抗原ペプチドとし、MIG-39抗体を得ることに成功した。作成した抗体を用いて免疫染色法を行いMIG-39の生体内での局在を観察した。MIG-39は生殖巣先端のDTCの核内および生殖細胞の核内に局在が見られた。この局在はmig-39 (tk107, tk102, では見られなかった。ヒトDREFでも同様な局在パターンが見られていることが報告されている(Yamashita et al., THE Journal of Biological Chemistry 282,7563-75,2007)。発現時期を明らかにするため、ステージ毎に免疫染色を行ったところ、L4幼虫期にはすでに局在しており、成虫期、成虫期から2日後では、DTCへの局在の割合が低下していた。このことから少なくともL4幼虫期にはMIG-39がDTCに局在していることが正常なDTCの停止に必要であることが分かった。L4幼虫期はDTCが減速を開始することも明らかにしており今回の結果は減速時期と一致していた。2. 低分子量G蛋白質との相互作用低分子量G蛋白質は一般的に細胞移動や、仮足の伸長などにかかわっていることが知られており、細胞骨格と細胞移動が関与しているかを、遺伝的手法を用いて調べることとした。低分子量G蛋白質をコードしているced-10/Rac GTPase, rac-2/Rac, unc-73/Rho GEF, mig-/Rho2の単独変異およびmig-39変異体との二重、三重変異体でDTCの行き過ぎ(overshoot)がどう変化するかを腹側の神経とDTCを蛍光標識し観察した。観測の結果、低分子量G蛋白質をコードしている遺伝子の単独変異ではovershootが見られなかったが、mig-39変異体頭側と尾側の生殖巣において異なる結果が得られた。このことから低分子量G蛋白質の活性が頭側と尾側で異なっており、頭側と尾側でRac活性に対する感受性が異なることが分かった。特に前側ではRacの活性が一定の割合まではovershoot異常を増強し、その割合を下回ると抑制に働くことが分かり、尾側はその逆であることが分かった。

1. The analysis of MIG-39 antigen and MIG-39 antibody was successful. The immune staining method was used to detect the presence of MIG-39. MIG-39 is the first generation of DTC in the nucleus and the second generation of DTC in the nucleus.この局在はmig-39 (tk107, tk102, では见られなかった。DREF is the same as DREF (Yamashita et al., THE Journal of Biological Chemistry 282,7563-75,2007)。The development stage is in the early stages, the adult stage is in the late stages, and the DTC is in the late stages. This is the first time that a DTC has been established. L4 larval stage DTC deceleration period 2. Low molecular weight G protein interaction Low molecular weight G protein is generally related to cell movement, foot elongation, and cell bone movement. Low molecular weight G protein is a single variant of ced-10/Rac GTase, rac-2/Rac, unc-73/Rho GEF, mig-/Rho2, mig-39, and a double or triple variant of DTC. The results of the test showed that the low molecular weight G protein was different from the original one in the middle of the reproduction, and the mig-39 variant was different from the original one in the head and tail. The activity of low molecular weight G protein varies from head to tail, and the sensitivity varies from head to tail. In particular, the activity of Rac in the front side is increased, and the activity of Rac in the rear side is increased.