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血液－胸腺関門を支える分子基盤の解明

阐明支持血胸腺屏障的分子基础

基本信息

批准号：
12J03485
负责人：
長竹貴広
金额：
$ 0.7万
依托单位：
独立行政法人医薬基盤研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.血管内皮細胞株を用いた経内皮電気抵抗(TEER)測定Cld5を強制発現させた血管内皮細胞株はGFPを導入した対照群に比べてTEER値が顕著に高く、バリア機能が強いことが示唆された。2.Cld5 KOマウスを用いた血管透過性試験胎仔の頚静脈よりトレーサーを投与し、胸腺における血管透過性を免疫組織化学的解析に供した。Cld5^<+/+>マウスの胸腺には血管内のみにトレーサーシグナルが検出されたものの、Cld5^<-/->マウスでは皮質実質領域にトレーサーが拡散していた。3.スフィンゴシン1リン酸(SIP)の血管透過性試験テトラメチルローダミンで標識したSIPをトレーサーとして用い、成体マウスの尾静脈より投与した。その結果、血液由来SIPは髄質領域に拡散するものの皮質領域実質では検出されなかった。血管周囲をさらに詳しく観察すると、Cld5陰性血管の周囲において強いSIPシグナルが観察された。興味深いことに、成体マウスの胸腺を観察すると、Cld5陰性血管の内腔にCD3^<High>リンパ球が観察された。PEで標識した抗CD4抗体を尾静脈より投与し血管内染色を行うと、選択的にCld5陰性血管の内腔に移出胸腺細胞が観察された。以上の結果により、血液-胸腺関門の分子基盤としてCld5が必須の役割を果たすこと、さらに、その免疫生物学的意義の一端として、成熟胸腺細胞の移出箇所を限定し、髄質での自己寛容成立を確実なものとしている可能性が示唆された。本研究結果は、Cld5の発現を制御することで胸腺細胞の移出を制御する新たな免疫調整薬の開発に向けた基礎的基盤情報になると考えられる。

1. Endothelial cell strain was tested for endothelial electrical resistance (TEER) by Cld5. GFP was introduced into the vascular endothelial cell strain and the TEER value was higher than that of the control group. 2. Immunohistochemical analysis of vascular permeability in fetal veins Cld5 ^<+/-> The thymus is the center of the blood vessel. 3. The vascular permeability test of SIP is used to identify SIP and its tail vein. As a result, the blood SIP is dispersed in the cortical field and the blood SIP is dispersed in the cortical field. The blood vessels were examined in detail, and the blood vessels were examined in detail. In the heart of the heart, the body of the thymus, the body of the CD5 negative vessel, the body of the thymus<High>. PE marker anti-CD4 antibody was injected into the tail vein and stained in the blood vessel, and the thymocytes were removed from the lumen of the Cld5 negative blood vessel. These results demonstrate the possibility that the molecular basis of the blood-thymocyte pathway is essential for the immune function of thymocytes, and that the migration of mature thymocytes is limited to the establishment of a free space for thymocytes. The results of this study provide a basis for the development of novel immune regulation mechanisms for the prevention of CD5 expression and thymocyte migration.