病原性クラミジアのリンパ球細胞を巧みに利用した感染防御回避機構の解明

阐明巧妙利用致病性衣原体淋巴细胞的感染防御逃避机制

• 批准号: 12J03692
• 负责人: 石田 香澄
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J03692/
• 关键词: クラミジア; III型分泌装置; CopN; Aldolase A; リンパ球細胞; DNAマイクロアレイ解析; 病原性クラミジア; IFN-γ; IDO

これまでに我々はクラミジアが上皮細胞だけでなくリンパ球細胞内においても増殖できることを見出してきた。このことから、クラミジアは様々な細胞に適応し増殖することができることが示唆されるが、それにはクラミジアのIII型分泌装置（T3SS）とそれを介して宿主細胞に打ち込まれるエフェクター蛋白質が重要な役割を担っていると考えられる。我々の予備的な検討からクラミジアのT3SSエフェクターであるCopNはリンパ球細胞においても上皮細胞に感染した時と同様に発現することがわかった。そこで我々はクラミジアがリンパ球細胞に感染する際にもCopNは何らかの役割を果たしていると考え、平成26年度はCopNに注目し研究を行った。我々は以前にChlamydia pneumoniaeのCopNがヒト解糖系酵素Aldolase Aと相互作用することを見出しており、平成26年度はリンパ球細胞に比べて実験が行いやすい上皮細胞を用いてCopNの機能解析に取り組んだ。まずAldolase Aとの結合に必要なCopNの領域を精査するために、大腸菌を用いて作製したCopNの欠失体とヒト上皮細胞（HEp-2細胞）とでプルダウンしSDS-PAGEとウエスタンブロッティングで解析した。その結果、Aldolase Aとの結合にはChlamydia pneumoniae CopNのC末端側の領域（270 ~ 399 aa）が重要であることがわかった。次に、aldolase Aの発現がクラミジア感染によって変化するかどうかについてqRT-PCRで解析を行った結果、aldolase Aは感染に伴い発現が上昇することがわかった。さらにaldolase Aノックダウン細胞ではクラミジアの増殖が増強したことから、Aldolase Aはクラミジア感染の何らかの刺激により発現が上昇し、クラミジア増殖を抑制する方向にはたらくことが示唆された。

This is the first time I've ever seen a woman who's had sex with someone else. The host cell is a type III secretory device (T3SS) that is responsible for the development of important proteins in the host cell. We prepared a report on T3SS, which was published in 2006. In 2006, the National Research Institute of Science and Technology (NSRI) conducted a study on the effects of CopN infection. We have previously found that the CopN of Chlamydia pneumoniae interacts with Aldolase A, a glycophytolytic enzyme. In 2006, we found that the CopN of Chlamydia pneumoniae interacts with Aldolase A in epithelial cells. The binding of Aldolase A to CopN is essential for the study of its domain and the analysis of its molecular structure by SDS-PAGE. Aldolase A and C terminal domain (270 ~ 399 aa) are important. The results of qRT-PCR analysis showed that aldolase A infection was associated with an increase in aldolase A infection. Aldolase A increases in the proliferation of aldolase A in cells infected with aldolase A and increases in the stimulation of Aldolase A in cells infected with Aldolase A and inhibits the proliferation of aldolase A.

项目成果

Protochlamydia induces apoptosis of human HEp-2 cells through mitochondrial dysfunction mediated by chlamydial protease-like activity factor.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0056005
• 发表时间: 2013
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Matsuo J;Nakamura S;Ito A;Yamazaki T;Ishida K;Hayashi Y;Yoshida M;Takahashi K;Sekizuka T;Takeuchi F;Kuroda M;Nagai H;Hayashida K;Sugimoto C;Yamaguchi H
• 通讯作者: Yamaguchi H

Amoebal endosymbiont Neochlamydia genome sequence illuminates the bacterial role in the defense of the host amoebae against Legionella pneumophila.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0095166
• 发表时间: 2014
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Ishida K;Sekizuka T;Hayashida K;Matsuo J;Takeuchi F;Kuroda M;Nakamura S;Yamazaki T;Yoshida M;Takahashi K;Nagai H;Sugimoto C;Yamaguchi H
• 通讯作者: Yamaguchi H

Chlamydial effector CopN interacts with human fructose-bisphosphate aldolase A

衣原体效应子 CopN 与人果糖二磷酸醛缩酶 A 相互作用

• 发表时间: 2014
• 作者: Kasumi Ishida;Junji Matsuo;Sumire Yamazaki;Shinji Nakamura;Hiroyuki Yamaguchi
• 通讯作者: Hiroyuki Yamaguchi

肺炎クラミジアのIII型分泌装置エフェクター CopNはaldolase Aと相互作用する

肺炎衣原体III型分泌器效应子CopN与醛缩酶A相互作用

• 发表时间: 2014
• 作者: 石田香澄;松尾淳司;山口博之
• 通讯作者: 山口博之

A unique genome feature of an amoebal endosymbiotic primitive chlamydia, Neochlamydia, showing intimate mutualistic interaction with Acanthamoeba

变形虫内共生原始衣原体（新衣原体）的独特基因组特征，显示出与棘阿米巴的密切互利相互作用

• 发表时间: 2013
• 作者: Kasumi Ishida;Junji Matsuo;Kyoko Hayashida;Tsuyoshi Sekizuka;Makoto Kuroda;Fumihiko Takeuchi;Hiroki Nagai;Chihiro Sugimoto;Hiroyuki Yamaguchi
• 通讯作者: Hiroyuki Yamaguchi