中心体制御を介した個体発生における分裂軸決定機構の解析

中心体控制介导的个体发育分裂轴决定机制分析

• 批准号: 12J03736
• 负责人: 大橋 翼
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J03736/
• 关键词: 中心体; 微小管; γ-tubulin; 紡錘体; 癌細胞; 細胞周期

細胞内における微小管は、γ-tubulin環状複合体(γ-TuRC)が足場となり、重合核を形成することで、効率的に形成されている。γ-tubulin遺伝子は真核生物で高度に保存されているが、哺乳動物には2種類のγ-tubulin(γ-tubulin1, 2)が存在する。本研究では、γ-tubulin2には新規スプライスバリアントが存在し、癌細胞株や脳で発現していることを同定していた。しかし、この結果はmRNAレベルでの解析であり、癌細胞や脳で発現しているγ-tubulin2タンパク質が、どのバリアントであるかは不明であった。そのため本年度は、γ-tubulin2スプライスバリアントのタンパク質発現を検出できる手法の開発を行った。本手法により、γ-tubulin2スプライスバリアントを分子量で分離することが可能となり、癌細胞株や脳で発現しているγ-tubulin2について解析したところ、全てのサンプルで既知バリアントであるγ-tubulin2Aのタンパク質発現が認められた。一方、新規スプライスバリアントであるγ-tubulin2Bは、mRNAは検出されたが、タンパク質の発現は確認されなかった。続いて、γ-tubulin1と2の機能的な違いについて解析した。γ-tubulin1の発現抑制により生じる双極性紡錘体形成異常は、γ-tubulin1を発現させることで回復できたが、γ-tubulin2では回復できず、双極性紡錘体形成において異なる機能を有していることが分かった。その原因として微小管ダイナミクスに着目し、γ-tubulin1またはγ-tubulin2を発現させた微小管の動態を観察すると、γ-tubulin2発現細胞ではγ-tubulin1発現細胞に比べて、カタストロフの発生頻度が低下し、微小管が安定化していることが明らかとなった。

The formation of intracellular microtubules, the formation of γ-tubulin ring complex (γ-TuRC), the formation of superposed nuclei, and the formation of efficient cells. γ-tubulin is highly conserved in eukaryotes and exists in 2 species of mammals (γ-tubulin1, 2). In this study, the new rules of γ-tubulin2 were established and the cancer cell lines were confirmed to be the same.しかし、このRESULTSはmRNAレベルでのANALYSISであり、Cancer cells や脳で発appearsしているγ-tubulin 2タンパク性が、どのバリアントであるかはUnknown であった.そのためthis yearは, γ-tubulin2スプライスバリアントのタンパク性発appearsを検出できる Techniqueの开発を行った. This technique can be used to separate the molecular weight of γ-tubulin2スプライスバリアントを, and the cancer cell lines can be separated by γ-tu bulin2についてanalyticsしたところ、全てのサンプルで知バリアントであるγ-tubulin2Aのタンパク性発 appear がcognizeめられた. One side, new rule スプライスバリアントであるγ-tubulin2Bは,mRNAは検出されたが,タンパクqualityの発appearsはconfirmationされなかった. Analysis of the functions of 続いて and γ-tubulin1 and 2. γ-tubulin1 inhibits abnormal bipolar spindle formation, and responds to γ-tubulin1.できたが, γ-tubulin2 では reply できず, bipolar spindle formation において なるfunction を有していることが分かった.そのCauseとしてmicrotubuleダイナミクスに目し、γ-tubulin1またはγ-tubulin2を発appearsさせたmicrotubuleのdynamicを観看すると、γ-tub ulin2-appearing cells ではγ-tubulin1 発appearing cells に比べて、カタストThe frequency of leucorrhea is reduced and the microtubules are stabilized.

项目成果

Functional analysis of γ-tubulin2 in cancer cells

癌细胞中γ-微管蛋白2的功能分析

• 发表时间: 2013
• 作者: S. Benner;A. Haijima;R. Kobayakawa;K. Kobayakawa;M. Kakeyama;C. Tohyama.;ベナー聖子;ベナー聖予;ベナー聖子;ベナー聖子;ベナー聖子;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi;大橋 翼;大橋 翼;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi
• 通讯作者: Tsubasa Ohashi

γ-tubulin2 is functionally different from γ-tubulin1 in cancer cells

癌细胞中 γ-微管蛋白 2 与 γ-微管蛋白 1 的功能不同

• 发表时间: 2014
• 作者: S. Benner;A. Haijima;R. Kobayakawa;K. Kobayakawa;M. Kakeyama;C. Tohyama.;ベナー聖子;ベナー聖予;ベナー聖子;ベナー聖子;ベナー聖子;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi
• 通讯作者: Tsubasa Ohashi

Functional analysis of γ-tubulin l and γ-tubulin2 in cancer cell lines.

癌细胞系中 γ-微管蛋白 L 和 γ-微管蛋白 2 的功能分析。

• 发表时间: 2013
• 作者: S. Benner;A. Haijima;R. Kobayakawa;K. Kobayakawa;M. Kakeyama;C. Tohyama.;ベナー聖子;ベナー聖予;ベナー聖子;ベナー聖子;ベナー聖子;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi;大橋 翼;大橋 翼;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi
• 通讯作者: Tsubasa Ohashi

癌細胞における中心体タンパク質y-tubulin2の発現解析

癌细胞中中心体蛋白y-tubulin2的表达分析

• 发表时间: 2013
• 作者: S. Benner;A. Haijima;R. Kobayakawa;K. Kobayakawa;M. Kakeyama;C. Tohyama.;ベナー聖子;ベナー聖予;ベナー聖子;ベナー聖子;ベナー聖子;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi;大橋 翼;大橋 翼
• 通讯作者: 大橋 翼

Expression analysis of y-tubulin2 in cancer cells

癌细胞中γ-微管蛋白2的表达分析

• 发表时间: 2012
• 作者: S. Benner;A. Haijima;R. Kobayakawa;K. Kobayakawa;M. Kakeyama;C. Tohyama.;ベナー聖子;ベナー聖予;ベナー聖子;ベナー聖子;ベナー聖子;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi;大橋 翼;大橋 翼;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi;Tsubasa Ohashi;大橋 翼;Tsubasa Ohashi;大橘 翼;大橋 翼
• 通讯作者: 大橋 翼