リンゴの自家不和合性反応における花粉側因子の機能解析と自他認識機構の解明

苹果自交不亲和反应中花粉因子的功能分析及自体-他人识别机制的阐明

• 批准号: 12J05202
• 负责人: 藤井 舞
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J05202/
• 关键词: バラ科; リンゴ; F-boxタンパク質; SFBB(S locus F-box brothers); SSK1(SLF-interacting Skp1-like protein 1); SBP1(S-RNase binding protein 1)

近年、多数のリンゴ自家不和合性花粉側S遺伝子候補SFBB (Slocus F-box brothers)が同定された。しかしこれら全てのSFBBが真の花粉側S遺伝子として機能するかどうかについては、現時点で不明である。本研究では、SFBBの生物学的機能解析と生化学的機能解析を行い、全てのSFBBが真の花粉S遺伝子であるかどうかを明らかにする事を目的とした。〈リンゴ形質転換体を用いたSFBBの生物学的機能解析〉SFBB遺伝子を、アグロバクテリウム法を用いてリンゴの栽培品種『きたろう』に導入した。得られた複数の再分化個体についてサザンプロットを行った結果、1から数コピーの導入遺伝子が確認された。〈組換えタンパク質を用いたSFBBの生化学的機能解析〉ナス科Petunia inflataにおいて、SBP1 (S-RNase binding protein 1)やSSK1 (SLF-interacting Skp1-like proteiin 1)はCullin1 (CUL1)や、花粉側S因子であるSLFとともにE3複合体を構成することが報告されている。リンゴSFBBが真の花粉側S因子であるならば、SBP1もしくはSSK1、CUL1とともにE3複合体を構成することが予想される。リンゴ概要ゲノム情報をもとにリンゴSSK1ホモログ(MdSSK1)を花粉RNAから単離した。大腸菌で発現させたMdSBP1およびMdSSK1は、MdSFBB1と相互作用することがpull down assayにより示された。一方、大腸菌で発現させたMdSSK1は無細胞発現系を用いて発現させたMdCUL1と相互作用する事が明らかとなった。

In recent years, most of the リ ゴ ゴ ゴ of their own non-compatible pollen side S remains 伝 candidate SFBB (s locus F-box brothers)が have agreed to された. し か し こ れ ら full て の SFBB が pollen side S heritage is の 伝 son と し て function す る か ど う か に つ い て は, now some unknown で で あ る. This study で は, SFBB の biology function analytical と biochemical function of analytical line を い, whole て の SFBB が pollen S heritage is の 伝 son で あ る か ど う か を Ming ら か に す る matter を purpose と し た. < リ ン ゴ form quality planning in body を with い た SFBB の biology function resolution > SFBB heritage 伝 を, ア グ ロ バ ク テ リ ウ を ム method with い て リ ン ゴ の cultivars "き た ろ う" に import し た. Have ら れ た plural の redifferentiation individual に つ い て サ ザ ン プ ロ ッ ト を line っ た results, 1 か ら number コ ピ ー の import legacy 伝 son が confirm さ れ た. < Analysis of the biochemical functions of えタ, <s:1>, パ and を using たSFBB, ナス Petunia inflataにお, にお, て, SBP1 (S-RNase binding protein 1)や, SSK1 (SLF-interacting Skp1-like Proteiin 1) は Cullin1 (CUL1) S や, pollen side factor で あ る SLF と と も に E3 complex を constitute す る こ と が report さ れ て い る. リ ン ゴ SFBB が pollen side S factor is の で あ る な ら ば, SBP1 も し く は SSK1, CUL1 と と も に E3 complex を constitute す る こ と が to think さ れ る. リ ン ゴ profile ゲ ノ ム intelligence を も と に リ ン ゴ SSK1 ホ モ ロ グ pollen RNA (MdSSK1) を か ら 単 from し た. Coliform で 発 now さ せ た MdSBP1 お よ び MdSSK1 は, MdSFBB1 と interaction す る こ と が pull down assay に よ り shown さ れ た. Side, coliform で 発 now さ せ た MdSSK1 は cell free 発 practice while department を い て 発 now さ せ た MdCUL1 と interaction す る matter が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Identification of S-RNase binding protein1 (SBP1) homolog of apple (Malus×domestica).

苹果 (Malus × Domestica) 的 S-RNase 结合蛋白 1 (SBP1) 同源物的鉴定。

• 期刊: Plant Biotechnology
• 影响因子: 1.6
• 作者: Mai F. Minamikawa1. Daisuke Fujii;Hiroyuki Kakui;Nobuhiro Kotoda;Hidenori Sassa These authors contributed equally.
• 通讯作者: Hidenori Sassa These authors contributed equally.

リンゴにおけCullinlホモログとMdSBPl (Malus×domestical S-Rnase binding proteinl)のタンパク質間相互作用解析

苹果Cullinl同源物与MdSBPl（Malus×国产S-Rnase结合蛋白）的蛋白-蛋白相互作用分析

• 发表时间: 2012
• 作者: Y. Amada;X. Ning;K. Chen;Y. Nakagawa;K. Tomishige;南川舞・佐々英徳;Mai F. Minamikawa・Ruriko Koyano・Daisuke Fujii・Hidenori Sassa;OMai F. Minamikawa・Daisuke Fujii・Ruriko Koyano・Hiroyuki Kakui・Nobuhiro Kotoda・Hidenori Sassa;南川舞・小谷野瑠理子・藤井大輔・佐々英徳
• 通讯作者: 南川舞・小谷野瑠理子・藤井大輔・佐々英徳

Identification and characterization of S-RNase binding protein1 (SBP1) homolog of apple (Malus×domestica)

苹果（Malus×domestica）S-RNase结合蛋白1（SBP1）同源物的鉴定和表征

• 发表时间: 2012
• 作者: Y. Amada;X. Ning;K. Chen;Y. Nakagawa;K. Tomishige;南川舞・佐々英徳;Mai F. Minamikawa・Ruriko Koyano・Daisuke Fujii・Hidenori Sassa
• 通讯作者: Mai F. Minamikawa・Ruriko Koyano・Daisuke Fujii・Hidenori Sassa

Characterization of S-RNase binding proteinl (SBP1) homolog ofapple (Malus×domestica)

苹果（Malus×domestica）S-RNase 结合蛋白（SBP1）同源物的表征

• 发表时间: 2012
• 作者: Y. Amada;X. Ning;K. Chen;Y. Nakagawa;K. Tomishige;南川舞・佐々英徳;Mai F. Minamikawa・Ruriko Koyano・Daisuke Fujii・Hidenori Sassa;OMai F. Minamikawa・Daisuke Fujii・Ruriko Koyano・Hiroyuki Kakui・Nobuhiro Kotoda・Hidenori Sassa
• 通讯作者: OMai F. Minamikawa・Daisuke Fujii・Ruriko Koyano・Hiroyuki Kakui・Nobuhiro Kotoda・Hidenori Sassa

リンゴ花粉側S 因子候補SFBB とSSK1 (Skp1-like1) およびSBP1 (S-RNase binding protein1) のタンパ ク質間相互作用解析

苹果花粉 S 因子候选 SFBB、SSK1 (Skp1-like1) 和 SBP1 (S-RNase 结合蛋白 1) 的蛋白质-蛋白质相互作用分析

• 作者: 南川 舞;佐々 英徳
• 通讯作者: 佐々 英徳