肺疾患におけるRas-ERKカスケードの調節機構の解明とその治療に関する研究

Ras-ERK级联在肺部疾病及其治疗中的调控机制研究

• 批准号: 12J05613
• 负责人: 高野 晴子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J05613/
• 关键词: 肺線維症; 肺癌; Ras-ERKカスケード; ノックアウトマウス

私たちのグループは過去に内在的なRas-ERKカスケードのドミナントネガティブアンタゴニストとしてDA-Rafを同定し、DA-Rafを特異的に欠損するノックアウト(DA-Raf-KO)マウスを作製した。Ras-ERKカスケードは、ブレオマイシン(BLM)誘導性の肺線維症に関与しているが、その調節機構は明らかにされていない。昨年度の解析から、DA-Rafは2型肺胞上皮細胞(AEC2)においてBLM誘導性の肺線維症にRas-ERKカスケードの抑制を介して関わっている可能性が示唆された。そこでDA-Raf-KOマウスを用いて、以下の事柄を明らかにした。(1)DA-Raf-KOマウスではwtマウスに比較して、BLMが誘導する好中球などの炎症性細胞の浸潤を多く認めた。(2)DA-Raf-KOマウスにおいて炎症性サイトカインの発現亢進を認めた。従って、DA-RafはBLMが誘導する炎症反応を抑制的に制御すると考えられた。BLMは肺胞上皮細胞を標的とし、さらにDA-RafがAEC2に発現しているので、ラットAEC2株(RLE-6TN細胞)を用いて、分子メカニズムについて明らかにした。(1)DA-Rafのノックダウン(KD)によりBLMが誘導する炎症性サイトカインの発現がさらに増強された。(2)この炎症性サイトカインの発現上昇はp38インヒビターによって抑制された。(3)近年の研究からp38シグナリングは、BLMが肺胞上皮細胞に誘導するSASP (senescence-associated secretory phenotype)において中心的役割を果たすことが知られているので、DA-RafとSASPについてさらに解析した。(4)RLE-6TN細胞にBLMを添加するとSA-β-galの活性上昇と細胞の扁平化が見られた。(5)DA-RafのKDにより、BLM誘導性のSA-β-galの活性上昇と細胞の扁平化はさらに増悪した。これらのことから、DA-Rafは38シグナリングの上流でRas-ERKカスケードを抑制することによってBLM誘導性のSASPを抑制的に制御すると考えられる。

In the past, the Ras-ERK system was established in the same way as DA-Raf system, and DA-Raf system was established in different ways. Ras-ERK is involved in the induction of lung disease, and its regulatory mechanisms are involved in the development of lung disease. Last year's analysis revealed that DA-Raf could inhibit Ras-ERK expression in BLM-induced lung epithelial cells type 2 (AEC2). DA-Raf-KO is used for the following purposes: (1)DA-Raf-KO can induce more inflammatory cell infiltration in the brain than BLM. (2)DA-Raf-KO is a highly active inflammatory agent. DA-Raf and BLM induce inflammation and inhibit inflammation. BLM was identified by DA-Raf and AEC 2 in lung epithelial cells (RLE-6TN cells). (1)DA-Raf (KD) increases the development of inflammatory cells induced by BLM. (2)The development of inflammatory cells is increasing, and the inhibition of inflammatory cells is increasing. (3)In recent years, studies have been conducted on p38 and SASP (senescence-associated secretarial phenotype) induced by BLM in lung epithelial cells. (4) BLM addition in RLE-6TN cells resulted in an increase in SA-β-gal activity and cell flattening. (5)DA-Raf KD and BLM induced SA-β-gal activity increased and cell flattening decreased. DA-Raf 38 is the most important factor in inhibiting the activity of RAS-ERK in the upstream of BLM.

项目成果

RhoD activated by fibroblast growth factor induces cytoneme-like cellular protrusions through mDia3C.

• DOI: 10.1091/mbc.e12-04-0315
• 发表时间: 2012-12
• 期刊: Molecular biology of the cell
• 影响因子: 3.3
• 作者: Koizumi K;Takano K;Kaneyasu A;Watanabe-Takano H;Tokuda E;Abe T;Watanabe N;Takenawa T;Endo T
• 通讯作者: Endo T

Ras-ERKカスケードのアンタゴニストDA-Rafは肺胞形成を制御している

DA-Raf 是 Ras-ERK 级联的拮抗剂，调节肺泡形成

• 作者: 中村哲也;渡辺守;高野晴子，幡野雅彦，坂本明美，高野和儀，徳久剛史，遠藤 剛
• 通讯作者: 高野晴子，幡野雅彦，坂本明美，高野和儀，徳久剛史，遠藤 剛