プロトン感受性ＴＲＰＰ３チャネルの新規味覚受容機構の解明

质子敏感TRPP3通道的新型味觉受体机制的阐明

• 批准号: 12J08523
• 负责人: 樋口 大河
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: University of Toyama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J08523/
• 关键词: TRPP3; オフ応答; 味覚; 不活性化; パッチクランプ法; 二瓶選択実験; 温度; ゲーティング; TRP

本年度はTRPP3のゲーティングに関わる分子基盤と苦味受容における構造機能連関およびin vivoレベルにおけるTRPP3の苦味受容について詳細な検討を行った。1）TRPP3チャネルのゲーティング基盤と苦味応答との関連性の検討TRPP3チャネルの選択性フィルター近辺のアミノ酸残基のうち533番目のアスパラギン残基(N533)は、TRPP3チャネルのキニーネ応答に重要であり、キニーネに対するTRPP3チャネルの応答にはN533を基盤とした不活性化が関与することが示唆された。2）TRPP3ノックアウトマウスを用いた苦味受容解析TRPP3ワイルドタイプ (WT)マウスとTRPP3ノックアウト(KO)マウスを用いて、水とキニーネ溶液による長時間二瓶選択実験(48時間)を行い、キニーネ作用に対する忌避行動(オン応答)について検討した。キニーネ溶液摂取量の比率の濃度依存性に有意な差はみられなかった。続いて、キニーネ除去による後味に対する忌避行動(オフ応答)についての解析として、二瓶とも30 μMキニーネ溶液で前処理を行った直後に、水と30 μMキニーネによる短時間二瓶選択実験(15分間)を行った。その結果、KOマウスでは水よりもキニーネ溶液の摂取量が少なかったが、WTマウスでは水よりもキニーネ溶液を多く摂取する傾向を示した。また、in vitro実験でTRPP3活性に影響しない苦味物質であるデナトニウムを用いて同様に二瓶選択実験を行った。デナトニウム忌避におけるオン応答およびオフ応答のどちらにおいても、WTとKOマウスの間に有意な差はみられなかった。したがって、これまでにin vitroで観察された苦味物質のwash outによるTRPP3チャネル活性化に相当する事象がin vivoにおいても観察され、個体レベルにおいてTRPP3が苦味のオフ応答に関与しているものと考えられた。

This year, TRPP 3 molecular matrix and bitter taste tolerance are discussed in detail. 1) TRPP3 gene production and the correlation between the base and bitter taste of the TRPP3 gene production and the selectivity of the TRPP3 gene production and the near side of the acid residue of the TRPP3 gene production and the amino acid residue of the TRPP3 gene production. 2) TRPP3 (WT) TRPP 3 (KO) The concentration dependence of the ratio of the amount of the solution is intentionally different. After the treatment, two bottles of 30 μ M organic solution were selected for a short period of time (15 minutes). The results show that the amount of water in the solution is less than that in the solution. TRPP3 activity is affected by the presence of bitter substances in the vitro, and the presence of bitter substances in the vitro is affected by the presence of bitter substances in the vitro.デナトニウム忌避におけるオン応答およびオフ応答のどちらにおいても、WTとKOマウスの间に有意な差はみられなかった。TRPP3 is activated in vitro and is detected in vivo.

项目成果

味覚に関わるPKD2L1カチオンチャネルの調節機構の分子構造基盤

PKD2L1阳离子通道参与味觉调节机制的分子结构基础

• 发表时间: 2014
• 作者: 樋口 大河;清水 貴浩;藤井 拓人;Nilius Bernd;酒井 秀紀
• 通讯作者: 酒井 秀紀

PKD2L1チャネルの不活性化に関わる分子構造基盤

PKD2L1通道失活的分子结构基础

• 发表时间: 2014
• 作者: Mimura J;Yoshida H;Kosaka K;Itoh K.;樋口大河，清水貴浩，藤井拓人，Nilius Bernd，酒井秀紀
• 通讯作者: 樋口大河，清水貴浩，藤井拓人，Nilius Bernd，酒井秀紀

温度上昇によるTRPP3チャネルのゲーティング解析

TRPP3 通道因温度升高而进行的门控分析

• 发表时间: 2013
• 作者: 樋口 大河;清水 貴浩;藤井 拓人;Nilius Bemd;酒井 秀紀
• 通讯作者: 酒井 秀紀

Molecular basis of voltage-dependent inactivation of TRPP3 channels

TRPP3 通道电压依赖性失活的分子基础

• 发表时间: 2014
• 作者: 樋口 大河;清水 貴浩;藤井 拓人;Nilius Bernd;酒井 秀紀
• 通讯作者: 酒井 秀紀

Modulation of TRPP3 channel function by increasing temperature

通过升高温度调节 TRPP3 通道功能

• 发表时间: 2013
• 作者: S. Ikehata;D. Wipf;Y. Matsushita and K. Aizawa;樋口 大河
• 通讯作者: 樋口 大河