Functional intravital imaging of the breast tumor invasion process in tumor microenvironment

肿瘤微环境中乳腺肿瘤侵袭过程的功能性活体成像

• 批准号: 23701053
• 负责人: KAMIOKA Yuji
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23701053/
• 关键词: FRET; 蛍光共鳴エネルギー移動; イメージング; 癌微小環境; 生体イメージング; ERK; PKA; 低分子量Gタンパク質; Rhoファミリー; 乳癌; 国際情報交流

A variety of fluorescent biosensors based on the principle of Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) have been well used to visualize the activities of various signaling molecules in vitro. However, living tissues actually consist of many kinds of cells and cellular interactions in three-dimensional environments.Recent studies show the importance of tumor microenvironment comprising of tumor cells and stroma cells. In this project, molecular activities of ERK, PKA and Rac1 were visualized by using genetically-encoded FRET biosensors in living mice under two-photon microscope for the understanding of tumor microenvironment in vivo. We have developed transgenic mice which express FRET biosensors for ERK and PKA in this project. In addition, imaging tools, stabilizer and windows were developed to get motion-less images and keep mice alive. These results achieved by intravital imaging can progress the studies about tumor microenvironment.

基于荧光共振能量转移（FRET）原理的各种荧光生物传感器已被很好地用于体外可视化各种信号分子的活性。然而，活组织实际上是由多种细胞组成的，细胞间的相互作用是三维立体的，近年来的研究表明，肿瘤微环境的重要性日益突出，其中包括肿瘤细胞和基质细胞。本项目利用基因编码的FRET生物传感器在双光子显微镜下观察ERK、PKA和Rac 1的分子活性，以了解肿瘤体内的微环境。本研究利用转基因小鼠成功地表达了ERK和PKA的FRET生物传感器。此外，还开发了成像工具、稳定器和窗口，以获得无运动图像并保持小鼠存活。活体成像的这些结果为肿瘤微环境的研究提供了新的思路。

项目成果

Live Imaging of Protein Kinase Activities in Transgenic Mice

转基因小鼠蛋白激酶活性的实时成像

• 发表时间: 2012
• 作者: Yuji Kamioka;Kenta Sumiyama ;Rei Mizuno and Michiyuki Matsuda
• 通讯作者: Rei Mizuno and Michiyuki Matsuda

京都大学大学院 生命科学研究科・生体制御学 医学研究科・病態生物医学 松田研究室

京都大学研究生院生命科学研究生院、生物控制科学研究生院、医学研究生院、病原医学研究科、松田研究室

Visualization of ERK and PKA activities in the tumor microenvironment consisting of lung-metastasized 4T1 murine breast tumor cells

由肺转移的 4T1 小鼠乳腺肿瘤细胞组成的肿瘤微环境中 ERK 和 PKA 活性的可视化

• 发表时间: 2014
• 作者: Yuji Kamioka;Kenta Sumiyama;Rei Mizuno;Yoshiharu Sakai;Eishu Hirata;Etsuko Kiyokawa and Michiyuki Matsuda;加藤 琢哉;Kajiya K.;Yuji Kamioka and Michiyuki Matsuda
• 通讯作者: Yuji Kamioka and Michiyuki Matsuda

Live Imaging of Protein Kinase Activitiesin Transgenic Mice(口頭発表、ポスター発表)

转基因小鼠蛋白激酶活性的实时成像（口头演示、海报演示）

• 发表时间: 2012
• 作者: Naito H;Kidoya H;Sakimoto S;Wakabayashi T;Takakura N;上岡裕治
• 通讯作者: 上岡裕治

京都大学大学院 医学研究科 病態生物医学講座

京都大学医学研究科病理生物学·生物医学系