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絶滅危惧両生類における遺伝的多様性評価と保全のための包括的研究

濒危两栖动物遗传多样性评估和保护的综合研究

基本信息

批准号：
24310173
负责人：
住田正幸
金额：
$ 11.07万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

① マイクロサテライト（SSR）の開発とこれらを用いた集団構造の解析：南西諸島産絶滅危惧種イシカワガエル・アマミイシカワガエル・イボイモリ・オットンガエル・ホルストガエルおよびバングラデシュ産トラフガエルについてSSRマーカーを開発し、これらを用いてジェノタイピングを行い、各種について集団内の遺伝的多様性と集団間の遺伝的構造を解明した。② 種ごとに適切な人工受精法と飼育法の確立：南西諸島産絶滅危惧種イシカワガエル・アマミイシカワガエル・イボイモリ・ホルストガエル・オットンガエル・アマミハナサキガエルについて、各種各集団について、人工受精と飼育条件の最適化を行い、各種に適切な飼育法を確立した。アマミイシカワガエルとイボイモリについては飼育下での自然繁殖によって２代目が誕生した。③精子凍結保存法の確立の試み：南西諸島産の準絶滅危惧種アマミアカガエルと絶滅危惧種アマミイシカワガエルを用いて、超低温槽を用いた精子凍結保存法の確立を試みた。24時間～1年間凍結保存後の精子を解凍し、精子の運動を観察するとともに、人工受精法によって受精率を測定した。その結果、試みたどの期間でも解凍精子にある程度の運動能がみられ、24時間凍結精子の受精率は、アマミアカガエルでは最大86%、アマミイシカワガエルでは最大35％であった。④遺伝マーカーによる血縁度測定と種親選定による計画的交配：アマミイシカワガエルの飼育下繁殖個体を用いて、血縁度の異なるいろいろな組合せで人工交配を行い、それぞれの子孫について生活力を検証し、飼育下で遺伝的多様性を維持できる継代飼育システムを確立した。

Analysis of the development of SSR: The extinction crisis in the Ryukyu Islands is described as the development of SSR, the use of SSR, the diversity of the genetic diversity within the various groups, and the structure of the genetic diversity between groups. (2) Establishment of appropriate artificial insemination and breeding methods: extinction risk species in Ryukyu Islands; optimization of artificial insemination and breeding conditions; establishment of appropriate breeding methods. 2 generations of natural reproduction under breeding (3) The establishment of sperm freezing preservation method: The quasi-extinction crisis species produced in the Ryukyu Islands are used in the middle of the ultra-low temperature bath. Sperm thawing and sperm motility were observed after 24-year freezing and fertilization. The results showed that the sperm motility of the thawed sperm was higher than that of the frozen sperm in 24 hours, and the fertilization rate of the frozen sperm was 86% and 35% respectively. (4) The selection of breeding species and the selection of breeding species for planned mating: the selection of breeding individuals, the selection of breeding species and the selection of breeding species for artificial mating, the selection of breeding species for offspring, the identification of viability, the maintenance of diversity of breeding species for breeding