小胞体ストレス反応と非感染性自然免疫応答の相互関連によるＡＩＨ慢性化機構の解析

基于内质网应激反应与非感染性先天免疫反应相互关系分析AIH慢性化机制

• 批准号: 24790722
• 负责人: 中野 真範
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24790722/
• 关键词: 自己免疫性肝炎; miRNA

＠AIH発症時の肝内TregのmiRNAプロファイル解析と機能発現に影響を及ぼす因子の解析§miRNAプロファイル解析によるTregの分化、機能発現異常の検討：正常マウス及びモデルマウスの肝内浸潤単核球をコラゲナーゼ処理とGentleMACSにより迅速に分離、MACSTreg分離キットにより肝内浸潤Treg分画を得てtotal RNAを抽出し、Ambion社のmiRNA Isolation Kitを用いてmiRNAを抽出して得られたmature miRNAを、mature miRNAを選択的にラベル化するアジレント社の miRNA Complete Labeling Reagent and Hyb Kitを用いてラベルし、既知の866種のマウスmature miRNA probeがコートされたアジレント社のmiRNAアレイV3に供し、包括的なmiRNA発現プロファイル解析を行った。その結果、モデルマウスでは正常マウスに比し18種のmiRNAの発現増加、28種のmiRNAの発現低下が見られた。これらのmiRNAをGO解析により免疫反応に関連したものに限定したところ、発現増加を認める7種のmiRNA、低下を認める9種のmiRNAが同定された。これらの発現をRT-PCRにより定量的に解析したところ、発現増加を認めた7種のうち5種、発現低下を認めた9種のうち6種のmiRNAが実際に増加または低下していた。現在、これらのmiRNAの標的mRNAの同定を解析ソフトにより試みている。

miRNA analysis and functional development of intrahepatic Treg during AIH development. Analysis of miRNA factors affecting Treg differentiation and functional development: Total RNA extraction from normal and mature miRNA extraction from gentleMACS The miRNA Complete Labeling Reagent and Hyb Kit for mature miRNA selection was used to analyze 866 known mature miRNA probe for miRNA V3, including miRNA generation. As a result, miRNA expression was higher than normal for 18 miRNAs and lower for 28 miRNAs. 7 miRNAs and 9 miRNAs were identified in the analysis of miRNAs and their association with immune response. 7 species of miRNA were identified and 9 species of miRNA were identified. Now, the target mRNA of the miRNA is analyzed by software.