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塩基感受性蛍光色素の開発とその応用

碱敏荧光染料的研制及其应用

基本信息

批准号：
24750158
负责人：
下川浩輝
金额：
$ 3万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究計画の主要な目的は、1)蛍光プローブの誘導展開、2)誘導展開したプローブを用いてのリンパ球単離、の二つであった。目的1)に関しては平成24年度までに達成しており、構造変換を促すpHを酸性側にまで拡張することは出来なかったが塩基性側ではpH10で蛍光を発する化合物の開発を達成しており、さらに、青から赤までの蛍光を発する誘導体を作成する事にも成功した。2)引き続いて、細胞混合物からの好塩基球の単離す実験に取り掛かった。まずは、ヒト慢性骨髄性白血病由来の幼若好塩基球であるKU812を用いて、その好塩基球への分化前後で染色性に差が出るかどうかを検討した。細胞の分化前後で、pH10に応答する蛍光プローブによって染色される顆粒の数が増加したことから、本蛍光プローブはKU812細胞の分化を見分けているかもしれないと考えられた。本実験の対照として、ヒト好酸球性白血病細胞株であるEoL-1を利用して行った。本細胞株は白血病由来の幼若好酸球であり、ブチル酸刺激によって成熟好酸球へと分化する。本細胞株を用いて同様の実験を行ったところ、分化の前後に関わらず、細胞内の何らかの顆粒が染色される事を見出した。さらに、この現象はリンパ球に限らず、HeLa細胞やNIH3T3、C2C12のような線維芽細胞においても観察された。このことから、本蛍光プローブによって染色される顆粒は、好塩基性顆粒とは異なるものであると考えられた。

The main objectives of this research project are: 1) induction of light and light; 2) induction of light and light; 3) application of light and light; 4) induction of light and light; Objective 1) To achieve this goal in 24 years, we have successfully prepared a photo-inducing substance for the development of a compound with a pH of 10 on the basic side. 2)The cell mixture is isolated from the substrate and the cell mixture is isolated from the substrate.まずは、ヒト慢性骨髄性白血病由来の幼若好塩基球であるKU812を用いて、その好塩基球への分化前后で染色性に差が出るかどうかを検讨した。Before and after cell differentiation, the number of KU812 cells stained with light increased at pH10. This paper reports the use of EoL-1 in human erythroid leukemia cell lines. This cell line is derived from leukemia and is stimulated by acid to differentiate into mature erythrocytes. This cell line is used for the identification of the same gene, the differentiation of the same gene, and the staining of the same gene in the cell. In addition, this phenomenon has been observed in HeLa cells and NIH 3T3, C2C12 and other linear germ cells. This is the first time that a person has ever been involved in a crime.