Structure-function studies on bilin reductase involved in linear tetrapyrrole formation

胆碱还原酶参与线性四吡咯形成的结构-功能研究

• 批准号: 5421335
• 负责人: Professorin Dr. Nicole Frankenberg-Dinkel
• 金额: --
• 依托单位: Fachgebiet Mikrobiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5421335?language=en
• 关键词: Structure; function; studies; bilin; reductase

Phytobiline sind lineare Tetraphyrrole, die eine bedeutende Rolle als prosthetische Gruppen des pflanzlichen Photorezeptors Phytochrom und der Lichtsammelpigmente in der cyanobakteriellen Photosynthese haben. Dieser Antrag befasst sich mit der Biosynthese des Phytobilins Phycoerythrobilin. Zwei verwandte Ferredoxin-abhängige Bilin-Reduktasen sind an dessen Biosynthese aus Biliverdin IXa beteiligt. Zur Bestimmung von Katalysekonstanten, Substratspezifität und Cofactor-Abhängigkeit sollen rekombinanten Bilin-Reduktasen PebA und PebB biochemisch untersucht werden. Mit Hilfe eines neu entwickelten Enzymtests sollen Elektronentransferasen gemessen werden. Diese sollen zur Bestimmung der katalytischen Konstanten an Anwesenheit von natürlichen und synthetischen Substraten dienen. ESR-Spektroskopie soll die Bildung eines Substratradikals während der Katalyse bestätigen. Weiterhin sollen mit Hilfe von limitierter Proteolyse, Deletionsmutagenese und domain swapping Aminosäurereste identifiziert werden, die für die Substraterkennung der beiden Bilin-Reduktasen wichtig sind. Zusätzlich soll die Beteiligung dieser beiden Enzyme am metabolic channeling mit Hilfe biochemischer Methoden wie FRET und Co-Immunpräzipitation aufgeklärt werden. Letztendlich hoffen wir, die Struktur von mindestens einer Bilin Reduktase mit Hilfe der Röntgenstrukturanalyse zu lösen.

植物胆素是一类四环素类化合物，在植物色素和光敏色素的光敏反应中起着重要的作用。作者首先介绍了藻红胆素的生物合成。两种铁氧还蛋白结合胆红素还原酶的生物合成方法可用于胆红素IXa的生物合成。因此，对催化剂稳定性、底物特性和辅因子-Abhängigkeit的测定需要结合生物素还原剂PebA和PebB进行韦尔登。Mit Hilfe neines neu entwickelten Enzymtests sollen Elektronentransferasen gemessen韦尔登.这是一个自然和合成底物的定量分析问题。ESR-Spektroskopie soll die Bildung eines Substratradikals während der Katalyse bestätigen.通过限制性蛋白水解、缺失突变和结构域交换等手段，可识别出韦尔登，从而确定Bilin-Reduktasen的底物。因此，我们用荧光共振能量转移和免疫共沉淀的方法，通过生物化学方法，使酶在代谢通道中发挥作用。让我们来看看，大脑的结构是如何通过对大脑结构的分析来实现的。