Zeitaufgelöste Darstellung des Zelleintritts und der frühen Infektion von HIV-1 an lebenden Zellen mittels Single Virus Tracing

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In diesem Projekt soll eine detaillierte Untersuchung der frühen Replikation des humanen Immundefizienzvirus (HIV) und deren Dynamik bzw. Inhibition mittels Single Virus Tracing (SVT) erfolgen. Grundlage des Projektes ist eine interdisziplinäre und Institutionen-übergreifende Zusammenarbeit zwischen den Arbeitsgruppen Kräusslich/Müller in der Virologie Heidelberg und Bräuchle in der Biophysikalischen Chemie München. In Heidelberg werden einfach und mehrfach fluoreszenzmarkierte HIV-ähnliche Partikel hergestellt und charakterisiert, die anschliessend in München mittels SVT analysiert werden. Ziel des Projektes ist die zeitaufgelöste Darstellung des Zelleintritts von HIV-1 an lebenden Zellen. Dabei sollen aufeinander folgende Schritte beim Viruseintritt von HIV in die Zielzelle untersucht werden. Dies betrifft die Einzelschritte (i) Membrananheftung, (ii) Membranfusion und (iii) intrazellulärer Transport der Replikationskomplexe zum Zellkern. Darüber hinaus soll der Einfluss von Inhibitoren spezifischer Schritte des HIV-Eintritts mittels SVT visualisiert werden. Somit bietet dieses Projekt die Möglichkeit, erstmals die einzelnen Schritte bei Virusbindung, Eintritt und intrazellulärem Transport direkt sichtbar zu machen und den Mechanismus einer antiviralen Substanz zu visualisieren.