卵胞発育を制御するＫＮＤｙ　（キャンディ）　ニューロンのパルス発生メカニズム

控制卵泡发育的KNDy（糖果）神经元脉冲产生机制

• 批准号: 14J04247
• 负责人: 池上 花奈
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J04247/
• 关键词: コンディショナルノックアウト; 弓状核キスペプチンニューロン; ギャップ結合; 生殖機能制御; 神経内分泌; キスペプチンニューロン; 生殖機能; 視床下部; グリア細胞; カルシウム測定

哺乳類における性腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)パルス発生メカニズムを解明することを最終目的とし、本年度は以 下3つの実験を遂行した。1. 脳領域特異的 キスペプチン遺伝子(Kiss1)ノックアウトマウスの作製：所属研究室で同定した弓状核キスペプチンニューロン特異的なエンハンサー配列を用い、弓状核キ スペプチンニューロン特異的に Cre リコンビナーゼを発現するマウスを Kiss1-flox マウスと交配するこ とで弓状核特異的な Kiss1 ノックアウトマウスの作出を試みた。その結果、弓状核のみならず前腹側室周囲核においても Kiss1 がノックアウトされたマウスを得た。2. 全身性Kiss1ノックアウトラットを用いた脳領域特異的キスペプチン遺伝子導入ラットの作製：全身性 Kiss1 ノックアウトラットを用い、成熟雌ラットの弓状核に Kiss1 遺伝子を搭載したアデノ随伴ウイルスを注入した結果、一 部の個体は膣開口を示した。アデノ随伴ウイルス誘導性のキスペプチンがGnRH/LH 分泌を促し、卵巣 からのエストロジェン分泌を促した結果、膣開口がおきたと考えられる。3.初代培養系を用いた Kiss1-GFP 細胞の神経活動に対するギャップ結合の関与： 弓状核キスペプチンニューロンが周辺の細胞とギャップ結合を形成しているか否かを検証すること を目的とした。キスペプチンニューロンを含む初代培養系を用い、ギャップ結合を通過できる Neurobiotin tracer をマイクロインジェクションする実験を行った。その結果、弓状核キスペプチンニューロンとグリア細胞間にギャップ結合が形成されていることを明らかにした。昨年度までの研究結果に本実験結果を追加し、論文を再々投稿した。

Mammalian gonadal stimulation release (GnRH) is the ultimate goal of this year's implementation of the next three steps. 1. Domain-specific selection of Cres (Kiss1): In the laboratory, the arcuate nucleus is selected from the same group, and the arcuate nucleus is selected from the same group. The arcuate nucleus is selected from the same group, and the arcuate nucleus is selected from the same group. The arcuate nucleus is selected from the same group. The result is that the arcuate nucleus is located in the anterior ventral nucleus. Kiss1 is located in the ventral nucleus. 2. Systemic Kiss1: Use of domain-specific Kiss1: Use of systemic Kiss1: Use of mature female Kiss 1: Use of domain-specific Kiss1 In response to this, GnRH/LH secretion was stimulated, and the secretion was stimulated. 3. The relationship between the neural activity of Kis1-GFP cells in primary culture and the formation of the arcuate nucleus, the peripheral cells, and the neural interaction between Kis1-GFP cells in primary culture The first generation culture system was established by using the Neurobiotin Tracer. As a result, the arcuate nucleus was formed into an intercellular complex. Last year's research results were added to the results of this study, and the papers were submitted again.

项目成果

NKB-NK3RシグナリングによるKNDyニューロンの神経活動制御メカニズム

NKB-NK3R信号传导KNDy神经元的神经活动控制机制

• 发表时间: 2014
• 作者: 池上花奈;美辺詩織;家田菜穂子;安部仁美;後藤哲平;前多敬一郎;束村博子;上野山賀久
• 通讯作者: 上野山賀久

マウス初代培養系を用いたKNDyニューロンにおけるCa2+オシレーションの同期メカニズムの解明

利用小鼠原代培养系统阐明 KNDy 神经元 Ca2+ 振荡的同步机制

• 发表时间: 2014
• 作者: 平田英隆;川村隆一;加藤雅也，篠田太郎;池上花奈
• 通讯作者: 池上花奈

Cell-to-cell communication via gap junctions may play a role in gonadotropin-releasing hormone pulse generation

通过间隙连接的细胞间通讯可能在促性腺激素释放激素脉冲的产生中发挥作用

• 发表时间: 2016
• 作者: Kana Ikegami;Nahoko Ieda;Shiori Minabe;Teppei Goto;Naoko Inoue;Kei-ichiro Maeda;Hiroko Tsukamura and Yoshihisa Uenoyama
• 通讯作者: Hiroko Tsukamura and Yoshihisa Uenoyama

Neurokinin B activates synchronized intracellular Ca2+ oscillations in KNDy neurons obtained from the hypothalamic arcuate nucleus of Kiss1-GFP transgenic mice.

Neurokinin B 激活从 Kiss1-GFP 转基因小鼠下丘脑弓状核获得的 KNDy 神经元中的同步细胞内 Ca2+振荡。

• 发表时间: 2014
• 作者: Kana Ikegami;Shiori Minabe;Nahoko Ieda;Teppei Goto;Hitomi Abe;Makoto Sanbo;Masumi Hirabayashi;Kei-ichiro Maeda;Hiroko Tsukamura & Yoshihisa Uenoyama
• 通讯作者: Hiroko Tsukamura & Yoshihisa Uenoyama

Involvement of gap junctional communications between KNDy neurons and glial cells in synchronized discharges of KNDy neurons in mice

KNDy 神经元和神经胶质细胞之间的间隙连接通讯参与小鼠 KNDy 神经元的同步放电

• 发表时间: 2017
• 作者: Kana Ikegami;Nahoko Ieda;Shiori Minabe;Teppei Goto;Naoko Inoue;Kei-ichiro Maeda;Hiroko Tsukamura and Yoshihisa Uenoyama
• 通讯作者: Hiroko Tsukamura and Yoshihisa Uenoyama