フロン代替物質１－ブロモプロパンによるニューロン新生抑制のメカニズムの解明

阐明CFC替代品1-溴丙烷抑制神经发生的机制

• 批准号: 14J04746
• 负责人: 張 霊逸
• 金额: $ 1.39万
• 依托单位: Tokyo University of Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J04746/
• 关键词: 親電子性物質; アクリルアミッド; 中枢神経; ノルアドレナリン神経; 神経新生; 1-ブロモプロパン

【目的】我々の過去の研究で1-ブロモプロパン（1-BP）暴露がヒトで抑うつ、不安症状、記憶・認知障害など、様々な中枢神経症状を引き起こすこと、ラットではノルアドレナリン神経線維、ノルアドレナリン量の減少、ニューロン新生の抑制を引き起こすことを明らかにしている。本研究では、同じ環境中のソフトな親電子性物質であるアクリルアミド暴露が1-BPと同様な中枢神経毒性を起こすことを確認し、環境中親電子性物質による中枢神経影響・認知機能障害の作用機序の解明、バイオマーカー探索を行う。【方法】10週齢雄Wistar STラット48匹を12匹ずつの4群に分け, 0,0.2、2、20mg/kg bwのアクリルアミドを 1日1回、週7日、5週間、gavageによって経口投与した。暴露終了後、各群12匹のうち6匹にBrdUを三回腹腔注射し、最後のBrdU注射後に左心室より4％パラフォルムアルデヒド緩衝液にて灌流固定、脳を剖出し、4％パラホルマリン緩衝液で後固定した。残り6匹を断頭・採血したあと、素早く脳を剖出し、各部位に分けして凍結保存した。灌流した脳の凍結切片を作成し、抗BrdU抗体を用いて免疫染色し、海馬歯状回のニューロン新生に対する影響を確認した。ドーパミンβハイドロキシラーゼ（DBH）免疫染色で1-BP暴露によるノルアドレナリン繊維の変化を確認した。前頭皮質、線条体、海馬ホモジェネート中におけるモノアミン量をHPLCを用いて測定した。【結果・考察】アクリルアミド曝露後、前頭皮質、海馬、線条体でのノルアドレナリン量は減少したが、セロトニン量は変化しなかった。前頭皮質ではノルアドレナリン神経線維密度が減少した。さらに海馬歯状回におけるニューロン新生が抑制された。アクリクアミドの特異的なノルアドレナリン神経への影響は1-BPの結果と一致している。環境中親電子性物質の中枢神経への影響には共通の作用機序が働いている可能性がある。

目的：我们先前的研究表明，1-溴丙烷（1-bp）暴露会导致各种中枢神经系统症状，包括抑郁症，焦虑症状，记忆力以及人类的认知障碍，并且在大鼠中，它会降低去甲肾上腺素能神经纤维的降低，甲肾上腺素水平，并抑制神经元的新生殖。在这项研究中，我们证实，在同一环境中的一种软亲电物质接触丙烯酰胺会导致中央神经系统的毒性类似于1-bp，我们将阐明由于环境中的电动物质而引起的中枢神经系统效应和认知功能障碍的作用机理，并寻找生物标志物。方法：将48个10周龄的雄性Wistar ST大鼠分为四组，12和0,0.2、2和20 mg/kg丙烯酰胺的丙烯酰胺，每天7天，每天7天，每天7天口服一次口服5周。暴露结束后，每组12只动物中有6只注入BRDU三次，在最终的BRDU注射后，将左心室用4％多聚甲醛缓冲液灌​​注，并解剖大脑并随后用4％的旁毛素抑制剂固定。斩首和剩余六只动物的斩首和血液收集后，大脑迅速尸检，分为不同的部位并冷冻。制备了灌注脑的冷冻切片，并使用抗BRDU抗体进行免疫染色，以确认对海马齿状回的神经元肿瘤的影响。多巴胺β-羟化酶（DBH）免疫染色证实了由于1 bp暴露而导致去甲肾上腺素纤维的变化。使用HPLC测量额叶皮质，纹状体和海马匀浆中的单胺水平。 [结果和讨论]在暴露于丙烯酰胺后，额叶皮层，海马和纹状体中的去甲肾上腺素水平后，羟色胺水平却没有改变。额叶皮质中的去肾上腺素能神经纤维密度降低。此外，抑制了海马齿状回的神经元新发生。亚肾上腺素能神经的特定作用与1 bp的结果一致。共同的作用机理可能会在亲电物质对环境中中枢神经系统的影响中发挥作用。

项目成果

Hepatic distribution of GST cannot explain the gap between humans and rodents for induction of cholangiocarcioma following exposure to dichloropropane

GST 的肝脏分布无法解释人类和啮齿动物在接触二氯丙烷后诱发胆管癌的差异

• 发表时间: 2015
• 作者: Zhang L;Zong C;Ichihara S;Naito H;Toyokuni S;Kumagai S;Ichihara G.;Lingyi Zhang;張霊逸
• 通讯作者: 張霊逸

A trial to find appropriate animal models of dichloropropane-induced cholangiocarcinoma based on the hepatic distribution of glutathione S-transferases

基于谷胱甘肽S-转移酶的肝脏分布寻找合适的二氯丙烷诱导胆管癌动物模型的试验

• DOI: 10.1539/joh.15-0085-oa
• 发表时间: 2015
• 期刊: Journal of Occupational Health
• 影响因子: 3
• 作者: Zhang L;Zong C;Ichihara S;Naito H;Toyokuni S;Kumagai S;Ichihara G.
• 通讯作者: Ichihara G.