ｎｃＲＮＡ／スプライシング因子を介した新規セントロメアサイレンシング機構の研究

ncRNA/剪接因子介导的新型着丝粒沉默机制研究

• 批准号: 14J09699
• 负责人: 牟田園 正敏
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J09699/
• 关键词: セントロメア領域; ヘテロクロマチン; スプライシング; non-coding RNA; セントロメア; 分裂酵母; イントロン

本研究は、セントロメア領域の構造が高等真核生物と高い類似性を示す分裂酵母を用いて、ヘテロクロマチン形成機構の解明を目指した。これまでの解析から、RNAi因子のCid12pとスプライシング因子が結合すること、セントロメア領域から発現するdg non-coding RNAにイントロンがあることを見出し、スプライシング因子を介したセントロメアヘテロクロマチン形成モデルを提唱した。前年度までに、dgイントロンの上流領域に結合する候補タンパク質（以降30Dと表記）を同定した。本年度は、同定した30Dタンパク質のヘテロクロマチン形成に関する働きについて調べた。抗体染色により30Dの局在を調べた結果、核内に分布することが分かった。さらに、30D欠失株を作成して表現型を調べた結果、微小管重合阻害剤であるThiabendazoleに高い感受性を示すこと、セントロメア領域のH3K9me2修飾がdcr1欠失株と同程度まで減少することが分かった。これらのことから、30Dは、dgイントロンに結合してヘテロクロマチン形成の促進を担っている可能性が示唆された。dgイントロンの特徴の一つとして、非常にスプライシング効率が悪い点が挙げられる。そこで、dgイントロン（加えて、antisense dgイントロン、dhイントロンに関しては前年度報告済み）以外のセントロメア領域に存在するイントロン7種においてスプライシング効率を調べた。その結果、7種全てのイントロンにおいてpre RNAのバンドが検出され、その多くのイントロンは、スプライシング効率が非常に悪いことが分かった。つまり、dgイントロン以外のセントロメア領域に存在するイントロンにおいてもスプライシング効率が悪いことが分かり、何らかの共通した働きがあることが示唆された。これは、セントロメア領域から発現するncRNAに関する新たな知見である。

This study aims to clarify the structure of higher eukaryotes and their high similarity to fission yeasts, and to clarify the mechanism of cell formation. The analysis of the RNAi gene Cid12p and the expression of the RNAi gene. In the previous year, the number of candidates in the upper field was determined by the number of candidates in the lower 30D table. This year, we will continue to adjust the labor related to the formation of 30D silicone quality and thermal insulation. Antibody staining results in 30D and distribution in nucleus In addition, 30D deficient plants were modified to produce phenotype modulation results, microtube recombination resistance, Thiabendazole, high sensitivity, and H3K9me2 modification in the field of DCR1 deficient plants were reduced. The possibility of promoting the formation of a new drug is demonstrated by the combination of 30D and dg. The characteristics of dg and color change from time to time, from time to time. There are 7 kinds of information in the field of information technology other than information technology (including information technology, anti-information technology, information technology and information technology). The results showed that 7 kinds of complete transcription factors, including pre-RNA, were detected, and many kinds of transcription factors, including pre-RNA and pre-RNA, were detected. There is no such thing as a common problem in the field of communication. The new knowledge of ncRNA related to the discovery of ncRNA in the field of natural resources

项目成果

セントロメアサイレンシング機構におけるdg ncRNA イントロンの役割

dg ncRNA内含子在着丝粒沉默机制中的作用

• 发表时间: 2014
• 作者: 牟田園 正敏;森田 京;塚原 千紘;知念 まどか;中山 潤一; 石井 浩二郎;井手上 賢;谷 時雄
• 通讯作者: 谷 時雄

セントロメアサイレンシングにおけるdg non-coding RNAイントロンの役割

dg非编码RNA内含子在着丝粒沉默中的作用

• 发表时间: 2014
• 作者: 牟田園正敏;森田京;塚原千紘;知念まどか;中山潤一;石井浩二郎;井手上賢;谷時雄
• 通讯作者: 谷時雄

分裂酵母dg ncRNAイントロン内に存在するHistone H3K9のメチル化を促進するシスエレメントの同定

裂殖酵母 dg ncRNA 内含子中促进组蛋白 H3K9 甲基化的顺式元件的鉴定

• 发表时间: 2015
• 作者: 牟田園 正敏;森田 京;塚原 千紘;知念 まどか;中山 潤一; 石井 浩二郎;谷 時雄
• 通讯作者: 谷 時雄

Regulation of RNAi-mediated formation of centromeric heterochromatin through ncRNA and the splicing machinery in fission yeast

通过 ncRNA 和裂殖酵母剪接机制调节 RNAi 介导的着丝粒异染色质形成

• 发表时间: 2015
• 作者: Masatoshi Mutazono;Misato Morita;Chihiro Tsukahara;Madoka Chinen;Jun-ichi Nakayama;Kojiro Ishii;Takashi Ideue;Tokio Tani
• 通讯作者: Tokio Tani

セントロメアncRNAに存在するmRNA型イントロンはセントロメアヘテロクロマチン形成の促進エレメントとして機能する

着丝粒 ncRNA 中存在的 mRNA 型内含子作为促进着丝粒异染色质形成的元件发挥作用

• 发表时间: 2015
• 作者: 牟田園 正敏;森田 京;塚原 千紘;知念 まどか;中山 潤一; 石井 浩二郎;谷 時雄
• 通讯作者: 谷 時雄