神経発達障害モデルマウスを用いた統合失調症様行動におけるＬＩＮＥ－１の関与

LINE-1 参与神经发育障碍模型小鼠的精神分裂症样行为

• 批准号: 15J03188
• 负责人: 村田 唯
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J03188/
• 关键词: 精神疾患; モデル動物; LINE-1; レトロトランスポゾン; DNAメチル化; 統合失調症; poly(I:C)モデル; エピジェネティクス

統合失調症を含む主要な精神疾患の病因・病態には、遺伝要因と環境要因の相互作用が深く関与していると考えられている。近年、統合失調症患者由来脳組織においてレトロトランスポゾンの一種であるLINE-1のコピー数が増大していることを見出した。さらに、精神疾患モデル動物であるpoly(I:C)モデルマウスにおいても、患者同様脳組織にてLINE-1コピー数増大が確認された。しかし、胎生期poly(I:C)曝露によるLINE-1活性制御の異常がどういった分子機構を介しているのかについては未だ解明されていない。本研究では、poly(I:C)モデルマウス用いて、LINE-1の転写・転移活性にどのような分子やゲノム修飾状態が関連しているのかについて検討するため、LINE-1プロモーター領域のDNAメチル化解析やRNA-seqおよびiTRAQ試薬を用いた発現量の網羅的解析を行った。poly(I:C)マウスより神経幹細胞・神経前駆細胞を磁気ビーズ法を用いて回収し、DNA、RNAおよびタンパクの精製を行った。LINE-1プロモーター領域のDNAメチル化解析の結果、poly(I:C)マウスでは、特定のLINE-1サブファミリーのハイドロキシメチル化率が上昇していることを示した。さらに、Illumina TruSeq (HiSeq4000)を用いたRNA-seq、そしてiTRAQ試薬を用いたproteome解析の結果、poly(I:C)マウス神経幹細胞・神経前駆細胞では、免疫応答に関連する遺伝子の発現が上昇していることが示された。これらの結果から、母体免疫活性によるLINE-1活性の制御には、LINE-1配列のDNA修飾状態や免疫応答関連遺伝子の発現変動が重要である可能性が示唆された。

Integrated disorders include the main causes and pathologies of mental illness, the interaction between genetic factors and environmental factors, and the interaction between them. In recent years, the origin of patients with integration disorder has been A kind of であるLINE-1のコピーnumber がincrease big していることを见出した.さらに、Mental illness モデル animal であるpoly(I:C)モデルマウスにおいても、Patient and patient's tissue にてLINE-1コピーnumber increaseがconfirmationされた.しかし、Exposure to poly(I:C) during viviparous period and LINE-1 active control abnormalityがどういったmolecule mechanismを开しているのかについては无だ解明されていない. In this study, poly(I:C)モデルマウスいて, LINE-1の転Write and change the active molecule やゲノムmodification state がrelated しているのかについて検问するため、LINE-1プロモーターarea DNA chemical analysis やRNA-seq およびiTRAQ trial 薬を ANALYSIS を行った using いた発真人のNET. Poly(I:C) マウスより神経Stem Cell・神経前槆Cell をMagnetic 気ビーズ Method いて Recovered し, DNA, RNA およびタンパクの Refined を行った. LINE-1 プロモーター domain DNA chemical analysis results, poly(I:C)マウスでは, the specific LINE-1 サブファミリーのハイドロキシメチルがrisesしていることをshowsした.さらに、Illumina TruSeq (HiSeq4000) Used いたRNA-seq, そしてiTRAQ test results using いたproteome analysis, pol y(I:C) マウス神経Stem cells・神経前槆 cells では、immune response にrelated する伝子の発appear がRISE していることが Show された. The result of the disease, the maternal immune activity, the control of LINE-1 activity, and the DNA modification status of LINE-1 arrangement are important and the likelihood of the current change in the immune response is related to the disease.

项目成果

統合失調症神経発達障害モデル動物におけるDNAメチル化解析

精神分裂症神经发育障碍模型动物DNA甲基化分析

• 发表时间: 2015
• 作者: 村田唯;文東美紀;窪田美恵;池亀天平;上田順子;宮内妙子;井上良夢;石渡みずほ;笠井清登;加藤忠史;岩本和也
• 通讯作者: 岩本和也

マウスLINE-1のDNAメチル化およびハイドロキシメチル化率測定系の構築

小鼠LINE-1 DNA甲基化及羟甲基化率测定系统的构建

• 发表时间: 2015
• 作者: 村田唯;文東美紀;窪田美恵;笠井清登;加藤忠史;岩本和也
• 通讯作者: 岩本和也

Analysis of DNA methylation of LINE-1 in poly(I:C) mice

Poly(I:C) 小鼠 LINE-1 DNA 甲基化分析

• 发表时间: 2015
• 作者: Murata Y;Bundo M;Kubota M;Ikegame T;Miyauchi T;Inoue R;Ishiwata M;Kasai K;Kato T;Iwamoto K
• 通讯作者: Iwamoto K

実験医学

实验医学

• 发表时间: 2011
• 作者: 松田憲之;尾勝圭;田中啓二
• 通讯作者: 田中啓二

Measurement of genomic copy number and DNA methylation levels of LINE-1 in the brains of poly(I:C) mouse model

Poly(I:C) 小鼠模型大脑中 LINE-1 基因组拷贝数和 DNA 甲基化水平的测量

• 发表时间: 2016
• 作者: Murata Y;Bundo M;Oh-nishi A;Kubota-Sakashita M;Ikegame T;Miyauchi T;Inoue R;Ishiwata M;Suhara T;Kasai K;Kato T;Iwamoto K
• 通讯作者: Iwamoto K