単純ヘルペスウイルスの核膜通過過程における機能性ＲＮＡの探索及び機能解明

单纯疱疹病毒核膜通过过程中功能RNA的寻找及其功能的阐明

• 批准号: 15J08446
• 负责人: 古旗 祐一
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J08446/
• 关键词: 単純ヘルペスウイルス; Us11; 核膜通過; 染色体; 核膜

単純ヘルペスウイルスは，ヒトに脳炎，性器ヘルペス，皮膚疾患，眼疾患，小児ヘルペスなど，多様な病態を引き起こす医学上極めて重要なウイルスである．そのゲノムには80個を超える遺伝子がコードされており，中でもUs11は，PKRやRIG-I等を阻害する免疫抑制因子として，盛んに研究されているウイルスタンパク質の一つである．しかしながら先行研究の多くが過剰発現系を用いた実験にとどまっており，感染細胞におけるUs11の知見は乏しい．そこで申請者は，感染細胞におけるUs11の機能解析を試みていた．第二年度までの結果より，Us11は宿主染色体とウイルス粒子複製の場の局在を制御することにより，効率的なウイルス粒子の核膜通過に寄与することが示唆されていた．そこで採用第三年度は，核膜通過効率の評価及び宿主染色体の局在制御機構の詳細な解析を試みた．まず電子顕微鏡を用いて野生型及びUs11欠損ウイルス感染細胞におけるウイルス粒子の核膜通過効率を評価した．その結果，Us11欠損ウイルス感染細胞では野生型感染細胞と比較して，核膜通過効率が減少し，ウイルス粒子が核内に蓄積されている様子が観察された．さらに宿主染色体局在制御機構の詳細な解析を試みたところ，Us11の宿主染色体局在制御能はウイルス感染細胞特異的であること，その機能発現にはウイルスタンパク質であるUL31との相互作用が必須であることを明らかとした．以上の結果より，Us11は染色体の局在を制御し，ウイルス粒子複製の場を核膜に近接させることでウイルス粒子の核膜通過を上方制御していることを見出した．本成果は未解明な部分の多かった感染細胞における宿主染色体の局在制御機構を明らかとするものであり、非常に興味深い知見であると考えている．

All kinds of diseases are very important in medicine, such as skin disease, eye disease, small children disease, multiple diseases. 80 genes are involved in this study, including US11, PKR, RIG-I, and other immunosuppressive factors. We have a lot of advanced research, and we have a lot of knowledge about infection in cells. The function analysis of the infected cells is tried. In the second year, the results showed that US11 had the ability to control the field of replication of host chromosomes and particles, and the ability to control the passage of nuclear particles through the nuclear membrane. In the third year, the nuclear membrane passage rate was evaluated and the host chromosome was analyzed in detail in the control mechanism. To evaluate the nuclear membrane penetration rate of wild type and U11 infected cells by electron microscopy As a result, US11-deficient cells infected with US11 decreased the nuclear membrane passage rate compared with wild-type cells, and US11-deficient cells accumulated in the nucleus. The host chromosome office in the control mechanism of the detailed analysis of the test, US11 host chromosome office in the control of its ability to infect cell-specific, and its functional development in the control of the nature of the UL31 interaction. As a result, the chromosome of Us11 is controlled by the field of nuclear membrane replication, and the field of nuclear membrane replication is controlled by the field of nuclear membrane replication. The results show that there are many unexplained parts of infected cells, host chromosomes, regulatory mechanisms, and very interesting deep knowledge.