イヌリンパ腫の病態におけるＣＤ４４およびそのバリアントアイソフォームの役割

CD44 及其变异亚型在犬淋巴瘤病理学中的作用。

基本信息

批准号：
15J10302
负责人：
茂木朋貴
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J10302/
关键词：
リンパ腫 CD44v ESRP1 cDNA microarray 犬 CD44

项目摘要

本研究は犬リンパ腫の病態において、CD44バリアントアイソフォーム（CD44v）を発現する細胞が薬剤耐性に関わり、再発や予後の悪化に繋がる事を証明することを目的としている。本年度はCD44v発現細胞の性状解析およびその発現制御メカニズムの解明を中心として行った。まず、CD44vが高発現だったリンパ腫症例から合計8種類のCD44vの塩基配列を決定し、その機能変化を解析した。その結果、CD44v6発現細胞株ではドキソルビシンおよびビンクリスチンに対する感受性が低下した。さらに、CD44v6発現細胞株ではHGF刺激によってPDK1およびAktの発現量が変化し、Akt阻害薬を添加することによってドキソルビシンおよびビンクリスチンに対する感受性が回復することが示された。次にリンパ腫症例からCD44v高発現症例および低発現症例を選抜し、cDNAマイクロアレイ解析に供し、CD44v高発現群と低発現群間で群間で2倍以上かつP<0.05の発現量の遺伝子を抽出した。発現量が変化していた上位5遺伝子について症例ごとに比較したところ、SCMLとESRP1の2遺伝子ではCD44v高発現群における最低値が低発現群における最高値を大きく上回っていた。そこで、ESRP1の機能解析を行ったところ、ESRP1の発現誘導に伴ってCD44vのタンパク質の発現亢進が認められ、ドキソルビシンおよびビンクリスチンに対する感受性の低下が認められた。さらに、多中心型高悪性度B細胞リンパ腫47頭の腫瘍細胞におけるESRP1の発現量を定量したところ、ESRP1高発現群における無増悪生存期間はESRP1低発現群よりも有意に短縮した。本研究により犬のリンパ腫におけるCD44vにおける発現量の違いは分子マーカーによって層別化を可能にし、治療反応性の悪い多中心型高悪性度B細胞性リンパ腫の予後を改善できる新たな治療戦略が示された。

这项研究旨在证明表达CD44变体同工型（CD44V）的细胞参与耐药性，从而导致犬淋巴瘤病理学中预后的复发和预后恶化。今年，我们专注于分析表达CD44V的细胞的特性，并阐明其表达控制的机制。首先，从高度表达CD44V的淋巴瘤病例中确定了总共八个不同的CD44V序列，并分析了功能变化。结果，表达细胞系的CD44V6对阿霉素和长春新碱不太敏感。此外，结果表明，HGF刺激改变了表达CD44V6的细胞系中PDK1和AKT的表达水平，并且添加Akt抑制剂可恢复对阿霉素和vincristine的敏感性。接下来，从淋巴瘤病例中选择了高表达和低表达CD44V的病例，并进行cDNA微阵列分析，并提取高表达CD44V和低表达CD44V组之间的基因2倍。当比较每种情况下具有不同表达水平的前5个基因时，两个基因SCML和ESRP1的高表达组中最低值显着高于低表达组的最高值。因此，当对ESRP1进行功能分析时，随着诱导ESRP1的诱导，CD44V蛋白的表达增加，对阿霉素和长春克氨酸的敏感性降低。此外，当在47个多中心高级B细胞淋巴瘤的肿瘤细胞中定量ESRP1表达水平时，高表达组的无进展生存率明显短于低表达组。这项研究表明了一种新的治疗策略，可以通过分子标记来改善多中心高级B细胞淋巴瘤的预后，从而可以在犬淋巴瘤中分层CD44V表达水平分层。