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シャペロンとオートファジーによるペルオキシソームの品質管理システムの解明

使用分子伴侣和自噬阐明过氧化物酶体质量控制系统

基本信息

批准号：
15J40032
负责人：
山田(後藤) 志野
金额：
$ 1.75万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

植物における新規のオートファジー因子を発見することを期待し、ペルオキシソームの増加を示す変異体（peup変異体：peroxisome unusual positioning）20ラインを解析対象とした。これらのラインにおいて、暗所飢餓における枯死、および液胞内プロテアーゼ阻害剤処理による液胞内小胞蓄積を認めた。よって、これらpeup変異体は、オートファジーが欠損している変異体であると考えられる。原因遺伝子を明らかにするために、peup10, 13, 15, 17についてマッピングを行い大まかな原因遺伝子の位置を決定した。次世代シークエンサー（NGS）を用いて網羅的に変異箇所を特定し、その中から非同義置換を引き起こす変異を抽出した。これらをマッピングのデータと照らし合わせ、候補となる原因遺伝子の絞り込みを行った。peup10について、候補遺伝子の欠損株を入手し、peup10変異体と交配を行い、アレリズムテストのためのF1を取得したが、F1ではpeup10の表現型が回復しなかった。すなわちこの候補遺伝子がpeup10変異体の原因遺伝子である可能性が高い。候補遺伝子はprotein kinaseであり、酵母および動物細胞のにおいて液胞輸送およびオートファジーの根冠に関わる重要な因子であることが報告されている。しかしながら、この因子を欠損した植物は致死となるため、植物での機能解析はほとんどなされていない。peup10変異体の研究は、植物におけるオートファジーのメカニズム解明に大きく貢献できると期待できる。peup13, 15は既知のオートファジー関連因子が原因遺伝子である可能性が高いことが明らかになったが、peup17はマッピングにより決められた領域内に既知のオートファジー関連遺伝子は存在しない。よってpeup17は植物における新規オートファジー関連因子であると期待できる。

Plant におけるNew Rules のオートファジーfactor を発见することをLooking forward to し、ペルオperoxisome unusual positioning) 20ラインをANALYSIS 対肖とした.これらのラインにいて, dark place starvation における dies, および intracellular leucocytosis プロテアーゼblocking agent treatment による intracellular vesicle accumulation をcognition めた.よって, これらpeup変variant body は, オートファジーが deficiency damage している変 variant body であると卡えられる. The reason is that the location of the child is determined by the location of the child. Next Generation System (NGS) uses the に変different 箇sho をSpecific し and the その中からnon-synonymous substitution をinduced きrise こす変different をdraw した.これらをマッピングのデータと光らし合わせ、Alternate となるreason 伝子の炊込みを行った. peup10について、Candidate 伝子の无码综合を到账速度、peup10変 heterogeneous body and mating を行い、アレリズムテストのためのF1をGet したが, F1ではpeup10のphenotypeがreply しなかった.すなわちこの candidate addendum 伝子がpeup10変variant の cause 伝子である possibility is high い. candidate 睝子はprotein kinase であり, yeast およびanimal cell のにおいて liquid cell transport およびオートファジーのroot crown に关わるimportant factor であることが report されている.しかしながら, このfactor をlack damage したplant はとなるため, plant でのfunctional analysis はほとんどなされていない. peup10変variant researchは、plantにおけるオートファジーのメカニズム开明に大きくcontributionできるとLooking forward to it. peup13, 15 It is known that the correlation factor is the cause, the possibility is high, the probability is high, and p eup17 It is known that there is a related legacy in the field of eup17はマッピングによりめられた.よってpeup17は Plant におけるNew Regulations オートファジー Related Factors であるとLooking forward to できる.