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胚発生を制御するシグナルカスケードの要素としての機械的力に関する研究

机械力作为控制胚胎发育信号级联组成部分的研究

基本信息

批准号：
16J01027
负责人：
石橋朋樹
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

平成30年度は、機械的力シグナルの受容・伝達に必要な遺伝子 (機械的力シグナル構成因子)の網羅的な同定および機械的力シグナル構成因子の突然変異体の発生解析を行った。平成28年度に同定した機械的機械的力シグナル構成因子から、3遺伝子(Hsp68, Hsp23, DnaJ-1)を選定し、その発現調節領域下流に、ΦC31システムを用いた組換えを利用して、改変型緑色蛍光タンパク質EGFPがインフレームで導入されたトランスジェニックショウジョウバエを作出した。これらの胚を、2枚のガラスプレートに挟んで圧迫することで、機械的力の負荷を行った。機械的力を負荷したまま、2時間、共焦点レーザー顕微鏡を用いてライブイメージングを行った。その結果、DnaJ-1は、圧迫によって有意に発現上昇することが分かった。また、より薄いスペーサーを用いて、より強い圧迫を負荷すると、Hsp23およびHsp68も、有意に発現上昇することが分かった。これらの結果は、機械的力シグナル構成因子は、機械的力によって発現誘導を受け、また、発現誘導に必要な機械的力の閾値は、遺伝子によって異なるということを示唆している。選定した遺伝子は、熱ショックストレス応答遺伝子であったため、熱ショックストレス応答のマスターレギュレーターであるHsfの突然変異体の表現型を観察した。Hsf突然変異体は、野生型と比較すると、胚性致死の表現型を示したが、形態に異常はなかった。このことは、発生の正常な進行に機械的力シグナルが必要である可能性を示唆しているが、それが熱ショックストレス応答によるものかは不明である。

In Pingcheng 30, the strength of machinery is tolerated to meet the necessary requirements (the force of the machine is a factor). The strength of the machine is the same as that of the network. the strength of the machine suddenly becomes a factor. In Pingcheng 28, the mechanical strength of the same machine was determined as a factor, and the system (Hsp68, Hsp23, DnaJ-1) was selected. In the field of production, Φ C31 equipment was used. The system was used to improve the performance of the EGFP system. The price of the machine, the strength of the machine, the strength of the machine and the strength of the machine. The power of the machine can be used in a two-hour, two-time, confocal micro-system. The results, DnaJ-1, and compelling results indicate that you are interested in making sure that the results are divided into different parts. Please tell me how to use it, how to use it, how to force it, how to use it, and so on. You can use it to make sure that you don't know what to do. If you want to use it, you will need to know if you want to Hsp68 it. The results of the test, the strength of the machine, the strength of the machine, the strength of the Choose to make sure that you don't know what to do, that you can answer the child, that you can answer the question, and that you can answer the question that you suddenly have a body table that you can observe. Hsf is characterized by sudden infestation, wild type, embryogenic lethality, and morphology. The strength of the normal operation of machinery and equipment in the normal operation of the equipment. The possibility of instigation and instigation of machinery is necessary.