肺炎レンサ球菌による血液脳関門突破機構の解明

肺炎链球菌突破血脑屏障机制的阐明

• 批准号: 16J02607
• 负责人: 広瀬 雄二郎
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J02607/
• 关键词: 肺炎レンサ球菌; 血液脳関門突破機構; 付着率; 侵入率; Ccs4

肺炎レンサ球菌は，肺炎や髄膜炎の主たる原因菌である．本菌が産生するcompetence induced protein Ccs4は形質転換誘導性タンパク質の一つとして報告されているが，病態発症における役割は未だ不明である．本年度の研究では，Ccs4が肺炎レンサ球菌の病原性に果たす役割を解析した．肺炎レンサ球菌TIGR4株を親株としてccs4欠失株を作製した．ccs4欠失変異株にプラスミドpDCermを用いてCcs4を再導入し相補株を得た．Ccs4が宿主の殺菌機構への抵抗性に寄与するかを調べるため，各菌株とマウス血液を混和し，培養後の菌体生存率を算定した．また，抗菌ペプチドLL-37に対する感受性試験を行った．次に，ヒト脳微小血管内皮細胞へ各菌株を感染させ，付着率と侵入率を算定した．さらに，マウスの尾静脈から各菌株を感染させ，感染後のマウスの生存時間を比較した．各菌株間で，マウス血液中の生存率，およびLL-37による最小発育阻止濃度及び最小殺菌濃度に差は認められなかった．その一方で，ヒト脳微小血管内皮細胞へのccs4欠失変異株の付着率と侵入率は，野生株および相補株と比較して有意に低下した．マウス静脈感染実験の結果から，ccs4欠失変異株感染マウスの生存時間は，野生株感染マウスと比較して有意に延長した．また、マウス静脈感染後24時間の血液中の細菌数は野生株感染マウスとccs4欠失株感染マウスで検出に差は見られなかったが、脳内の菌数においては、ccs4欠失株感染マウスでの検出数が有意に低下した。以上の結果より，肺炎レンサ球菌のCcs4は，自然免疫による殺菌からの回避には寄与せず，脳微小血管内皮細胞への付着および侵入に関与し，病原因子として働く可能性が示された．

The main cause of pneumonia is pneumonia. This strain produces competence induced protein Ccs4, which is characterized by a high level of protein induction and a low level of protein induction. This year's study analyzed the pathogenicity of Ccs4 pneumococcus. Ccs4 was reintroduced into the host cell and the resistance of the host cell was adjusted. The blood of each strain was mixed and the survival rate of the cell was calculated after culture. Antimicrobial resistance test LL-37 The infection rate and invasion rate of microvascular endothelial cells were calculated. In the evening, the tail vein of the virus was infected, and the survival time of the virus after infection was compared. The survival rate in the blood of each strain is different from that of LL-37. The minimum growth inhibition concentration and the minimum vitamin concentration are different. In addition, the rate of invasion of ccs4 in the absence of microvascular endothelial cells was significantly lower than that in the wild. The results of venous infection are different, and the survival time of ccs4 infected plants is longer than that of wild strains. The number of bacteria in the blood at 24 hours after intravenous infection was significantly lower than that of wild strain infection. The above results show that Ccs4 of pneumococcus pneumoniae is related to the invasion of microvascular endothelial cells and the possibility of pathogenic factors.

项目成果

肺炎球菌のCcs4 は脳血管内皮細胞への侵入に寄与する病原因子である

肺炎球菌 Ccs4 是一种毒力因子，有助于侵袭脑血管内皮细胞

• 发表时间: 2017
• 作者: Hirose;Y.;Yamaguchi;M.;Kawabata;S.;Murakami;M.;Nakashima;M.;Gotoh;M.;Yamamoto;T.;山口雅也，広瀬雄二郎，後藤花奈，竹村 萌，住友倫子，中田匡宣，川端重忠;広瀬雄二郎，山口雅也，後藤花奈，住友倫子，中田匡宣，川端重忠;後藤花奈，山口雅也，広瀬雄二郎，住友倫子，中田匡宣，川端重忠;山口雅也，中田匡宣，住岡龍一，和田聖史，広瀬雄二郎，明田幸宏，住友倫子，川端重忠;住友倫子，中田匡宣，山口雅也，川端重忠;広瀬雄二郎，山口雅也，後藤花奈，住友倫子，中田匡宣，川端重忠
• 通讯作者: 広瀬雄二郎，山口雅也，後藤花奈，住友倫子，中田匡宣，川端重忠

肺炎球菌が発現する形質転換誘導性タンパク質Ccs4の病原性への関与

肺炎球菌表达的转化诱导蛋白 Ccs4 参与致病性

• 发表时间: 2016
• 作者: 広瀬雄二郎;山口雅也;後藤花奈;住友倫子;中田匡宣;川端重忠
• 通讯作者: 川端重忠

形質転換誘導性タンパク質Ccs4がStreptococcus pneumoniae の病原性に与える影響

转化诱导蛋白Ccs4对肺炎链球菌毒力的影响

• 发表时间: 2016
• 作者: 広瀬雄二郎;山口雅也;後藤花奈;住友倫子;中田匡宣;川端重忠
• 通讯作者: 川端重忠