新規がん抑制遺伝子型ｍｉｃｒｏＲＮＡの探索と創薬への展開

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今年度は、microRNAの腫瘍選択的な送達を達成するため、1) DDS分子のリンカー構造の最適化と 2)ポリアミン修飾によるリガンドコンジュゲートの細胞膜透過性の改善を行なった。1) リンカー構造を簡易に最適化するために、リンカー分子のアミダイト体を合成し、その配列を組み替えることでリンカー長の異なるDDSコンジュゲートを合成することに成功した。また、リンカーのアミダイトを用いて、DDS分子のスペーサー長を調節することにより、コンジュゲートsiRNAの細胞内導入効率を向上させることに成功した。2) では、RNAのリン酸ジエステル結合に由来する潜在的な低細胞膜透過性を改善するために、ポリアミン修飾を試みた。オリゴヌクレオチドへのポリアミン修飾法として市販されているポリスペルミンアミダイトを用いて、siRNAのパッセンジャー鎖にスペルミンを5-15分子結合したRNAを合成し、リガンドをコンジュゲートしたsiRNAのガイド鎖と組み合わせることで、ポリアミン-リガンド-siRNAコンジュゲートを新たに調整した。ポリアミン及びリガンドの単独修飾ではsiRNAの細胞膜透過性が見られなかった一方で、両分子を修飾したsiRNAは細胞内導入試薬を用いることなくsiRNA活性を示し、効率よく細胞内へデリバリーされていることが確認された。今後は昨年度探索したがん抑制遺伝子型microRNAに対して1) 及び2) 様の科学修飾を行い、microRNA医薬品への応用を検討していく。