１４－３－３　εａ　を介したホヤ脊索管形成機構の解析

点击翻译按钮获取中文摘要

昨年度までに14-3-3 εa クライアントタンパク質として三種類同定したが，これらをノックダウンしたところ，ホヤ脊索管形成阻害しなかったことから，これらは脊索管形成に関与しないことがわかった．そこで，ヒトにおいて14-3-3タンパク質と直接結合し (Chen et al., 2014), またホヤにおいて脊索細胞に強く発現，脊索管形成に実際に関与していることが知られているEzrin/Radixin/Moesin (Dong et al., 2011) に着目した．大腸菌より精製したホヤの14-3-3 εa と ERM はin vitroで直接結合し，免疫染色では脊索細胞の収縮環において共局在することを見出した．しかし，UTKO1を処理した個体では，in vitro の直接結合を阻害し，脊索細胞における共局在もキャンセルした．この収縮環における14-3-3 εa とERM の局在がどのように脊索管形成を誘導するのかさらに検証するため，ホヤ脊索細胞特異的なBrachyury promoter から蛍光タグした14-3-3 εa および ERM を発現させて挙動を調べたところ，収縮環から管腔に向けて周期的に移動していることを見出した．さらにこの時細胞質全体も同時に収縮環から管腔に向かって流動を引き起こしていることを見出した．しかしながら，UTKO1を処理した個体や，14-3-3 εa およびERMをノックダウンした個体では，そのような流動は見られなかった．これらのことから，収縮管における14-3-3 εa 及びERM の相互作用が収縮環から管腔に至る細胞質流動を誘導し，これがホヤの脊索管形成に貢献していることが示唆された．