１４－３－３　εａ　を介したホヤ脊索管形成機構の解析

14-3-3通过εa分析海鞘脊索管形成机制

• 批准号: 16J04182
• 负责人: 溝谷 優治
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J04182/
• 关键词: ホヤ; 脊索管形成; 14-3-3

昨年度までに14-3-3 εa クライアントタンパク質として三種類同定したが，これらをノックダウンしたところ，ホヤ脊索管形成阻害しなかったことから，これらは脊索管形成に関与しないことがわかった．そこで，ヒトにおいて14-3-3タンパク質と直接結合し (Chen et al., 2014), またホヤにおいて脊索細胞に強く発現，脊索管形成に実際に関与していることが知られているEzrin/Radixin/Moesin (Dong et al., 2011) に着目した．大腸菌より精製したホヤの14-3-3 εa と ERM はin vitroで直接結合し，免疫染色では脊索細胞の収縮環において共局在することを見出した．しかし，UTKO1を処理した個体では，in vitro の直接結合を阻害し，脊索細胞における共局在もキャンセルした．この収縮環における14-3-3 εa とERM の局在がどのように脊索管形成を誘導するのかさらに検証するため，ホヤ脊索細胞特異的なBrachyury promoter から蛍光タグした14-3-3 εa および ERM を発現させて挙動を調べたところ，収縮環から管腔に向けて周期的に移動していることを見出した．さらにこの時細胞質全体も同時に収縮環から管腔に向かって流動を引き起こしていることを見出した．しかしながら，UTKO1を処理した個体や，14-3-3 εa およびERMをノックダウンした個体では，そのような流動は見られなかった．これらのことから，収縮管における14-3-3 εa 及びERM の相互作用が収縮環から管腔に至る細胞質流動を誘導し，これがホヤの脊索管形成に貢献していることが示唆された．

In the past year, there were 14-3-3 εa, 3 kinds of similar fixed factors, such as the formation of notochordal tube, the formation of notochordal tube and the formation of notochordal tube.そこで，ヒトにおいて14-3-3タンパク质と直接结合し (Chen et al., 2014), Ezrin/Radixin/Moesin (Dong et al., 2011). Escherichia coli was purified and found to bind directly to ERM in vitro. Immunostaining showed that notochordal cells were isolated from the cytoplasm. UTKO1 is a direct binding inhibitor in vitro. 14 - 3 - 3 εa and ERM are detected in the induction of chordal duct formation, and chordal cell-specific Brachyury promoter is detected in the induction of chordal duct formation. At the same time, the cytoplasm of the whole body is contracted, and the lumen is flowed. UTKO1 is the only way to deal with this problem, 14-3-3 εa. 14-3-3 εa and ERM interactions induce cytoplasmic flow in the contraction of the chordal duct.

项目成果

Chemical genetics reveal the role of 14-3-3 εa in Ciona notochord tubulogenesis

化学遗传学揭示 14-3-3 εa 在海鞘脊索管状发育中的作用

• 发表时间: 2017
• 作者: Yuji Mizotani;Mayu Suzuki;Hidenori Watanabe;Kogiku Shiba;Kazuo Inaba;Kohji Hotta;Kotaro Oka;Etsu Tashiro;Masaya Imoto
• 通讯作者: Masaya Imoto

Chemical genetics reveal the requirement of 14-3-3 εa in Ciona notochord tubulogenesis

化学遗传学揭示海鞘脊索管状发育中 14-3-3 εa 的需求

• 发表时间: 2017
• 作者: Yuji Mizotani;Kohji Hotta;Kotaro Oka;Hidenori Watanabe;Kogiku Shiba;Kazuo Inaba;Mayu Suzuki;Etsu Tashiro;Masaya Imoto
• 通讯作者: Masaya Imoto

Chemical genetics identify 14-3-3 εa as a regulator in Ciona notochord tubulogenesis

化学遗传学鉴定 14-3-3 εa 作为海鞘脊索管状发生的调节因子

• 发表时间: 2017
• 作者: Yuji Mizotani;Mayu Suzuki;Hidenori Watanabe;Kogiku Shiba;Kazuo Inaba;Kohji Hotta;Kotaro Oka;Etsu Tashiro;Masaya Imoto
• 通讯作者: Masaya Imoto