マクロファージの長鎖　ｎｏｎ　ｃｏｄｉｎｇ　ＲＮＡによる生体恒常性維持機構

巨噬细胞长链非编码RNA维持生物稳态的机制

• 批准号: 16J04387
• 负责人: 松原 巧
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J04387/
• 关键词: 心臓マクロファージ; 恒常性維持; Areg; 骨髄マクロファージ; Amphiregulin; 不飽和脂肪酸; ノルアドレナリン; 長鎖non-coding RNA

我々は心臓マクロファージが心臓の圧ストレス応答に必須であることを明らかにしており、心臓マクロファージ特異的に発現しているAregが圧ストレス応答に必須であることを明らかにした。Aregは心臓マクロファージの機能的分化マーカーと考えられ、心臓マクロファージの心臓における恒常性維持機構の解析を行うにあたり、Aregを誘導するシグナル分子と、その受容体の検討を行い、心臓マクロファージの分化誘導に必須の転写因子とnon-coding RNAの同定を目的とした。心臓の環境因子に含まれるシグナル分子Aが作用する受容体Bについて遺伝子Bノックアウトマウスの骨髄移植を行い、レシピエントの心臓マクロファージでのAreg発現が半減していることを確認した。シグナル分子Cについて未分化マクロファージで検討したところ、シグナル分子Cの投与で未分化マクロファージでAregの発現が確認された。シグナル分子Cの受容体遺伝子の同定をsiRNAによるノックダウンで検討し、受容体遺伝子Dをノックダウンすると、シグナル分子Cによる未分化マクロファージでのAreg発現が抑制されることを明らかにした。さらに受容体遺伝子Dについては、CRISPR-Cas9によるノックアウトを用いて検討した。遺伝子Bノックアウトマウスから採取した造血幹細胞に遺伝子Dをノックアウトするレンチウイルスを感染させ、この造血幹細胞を骨髄移植し心臓マクロファージのAreg発現を確認した。遺伝子Dをノックアウトした心臓マクロファージではコントロールと比較してAreg発現が低下していることを確認した。本研究ではシグナル分子AとBおよび受容体遺伝子CとDが心臓マクロファージの分化に関与することを明らかにした。現在、これらの遺伝子の下流で心臓マクロファージ特異的に発現している転写因子とnon-coding RNAについて解析中である。

We have to make sure that the answer is correct. Areg is a functional differentiation factor and a non-coding RNA identity factor required for induction of differentiation in the heart. The environmental factors of the heart include the role of molecule A in receptor B, the role of molecule B in bone graft, and the role of molecule A in bone graft. The occurrence of the undifferentiated gene domain of the C molecule was confirmed. The expression of undifferentiated RNA was inhibited by siRNA targeting the receptor gene of the receptor gene C, and by siRNA targeting the receptor gene D. CRISPR-Cas9 is the first time that a receiver has been identified. Hematopoietic stem cell transplantation and bone marrow transplantation were confirmed. The first step is to confirm the existence of a new system. In this study, the molecular A and B and receptor C and D are related to the differentiation of heart disease. Now, the downstream of this gene is the development of a specific gene, a non-coding RNA gene, and the analysis of this gene.