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膜タンパク質に基づいた貪食能を有するクルマエビ血球細胞の新規分類方法の開発

基于膜蛋白的吞噬能力对虾血细胞分类新方法的建立

基本信息

批准号：
16J08185
负责人：
小祝敬一郎
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Tokyo University of Marine Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は，血球細胞を糖鎖に基づき分類するため，レクチンの血球細胞に対する反応性をフローサイトメーターおよび蛍光顕微鏡観察により確認した. その結果，クルマエビの血球細胞には，LEL および WGA が特徴的な染色性を示した.LEL は細胞表面に強い結合性を示す一方，WGA は細胞内の顆粒に強い結合を示すことが蛍光顕微鏡下で観察された.次に，ビオチン標識された LEL およびストレプトアビジン標識マイクロビーズを用いた細胞磁気標識法により， 2 つの血球細胞亜集団の分離に成功した . これら細胞集団は形態学的特徴およびその遺伝子転写産物の蓄積パターンから，既報の無顆粒球および顆粒球の 2 種類の集団であることが示唆された.その後，MACSシステムを用いた細胞亜集団の分離後，次世代シークエンサーにより各細胞亜集団の遺伝子転写産物を網羅的に解析した．LEL強陽性血球細胞では，トランスグルタミナーゼ関連遺伝子転写産物の蓄積が多かった．LEL弱陽性血球細胞では，抗菌ペプチドおよびクロッティング関連遺伝子転写産物の蓄積が多かった．また，in vitro でビーズの貪食を行わせた血球細胞をレクチン染色に供したところ，ビーズ貪食細胞に対して WGA が 100%の陽性率を示したことから，クルマエビにおいて顆粒球が貪食作用を主に担っていることが示唆された.

This year, blood cells are divided into two categories: blood cells, blood cells and blood cells. The results showed that the staining of LEL WGA was detected. The surface strength of LEL cells was strongly combined, and the combination of intracellular particles of WGA was observed under light microscope. For the second time, you can use the method of cellular magnetic tagging, the collection of blood cells, the collection of blood cells, and the separation of blood cells. The special device of the computer cell set, the special device of the computer, stores the memory of the device, and the two types of the device, which are free of particles, can be used to show that they are instigated. After that, after the MACS cluster was used to divide the data, the next generation cell collection wrote the analysis of the object network. LEL strong blood cells were stored in multiple cells. LEL weak blood cells were stored in the library. The antimicrobial agents were stored in the bacteria, and the blood cells were stained in the blood cells. The WGA cells were stained for the first time. The sex rate of the WGA cells was 100%. Please tell me that the grain ball plays an important role in feeding the food.