权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

アトピー性皮膚炎を制御するマイクロＲＮＡ依存性のＤＮＭＴ１発現機構の解明

阐明控制特应性皮炎的 microRNA 依赖性 DNMT1 表达机制

基本信息

批准号：
17J40074
负责人：
芳田祐子
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Musashino University (2018)Juntendo University (2017)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、昨年度に引き続きアレルギー性皮膚炎における樹状細胞のDNAのメチル化解析を行った。また新たに、外来遺伝子がゲノムに組み込まれる機構について解析を行った。現在遺伝子導入技術についての研究が進み、一定条件のもと目的の遺伝子を持つ細胞を得ることが可能となった。遺伝子導入を疾患治療法として応用する試みも行われている。これまでに、遺伝子導入に用いるベクターの安全性には不明点が残されている。一方で、ベクターを用いない遺伝子導入法は、ゲノムに挿入される目的遺伝子の位置がランダムであり、挿入位置によっては他の遺伝子の発現などに影響する可能性があるなどの問題がある。そこで、これまで不明であった、ゲノムへの遺伝子導入機構を制御する、ゲノム側の要因を解明することにより、より効果的な遺伝子導入技術への応用に貢献する基盤を形成することを目的に解析を行った。外来遺伝子がゲノムに組み込まれる機構の解析について、遺伝子組み込みにおけるゲノム側の特性に着目して解析を行うため、ウィルスベクターを使用せず、生体内細胞に遺伝子を直接移入する方法である、ハイドロダイナミックインジェクション法を用いて実験を行った。この方法により特に肝細胞に高い効率で遺伝子導入することができるため、肝細胞のゲノムへの遺伝子組み込み機構に着目して解析を行うことができる。これまでに、EGFPを発現するプラスミドDNAを用いてインジェクションを行い、EGFP発現を指標として、プラスミドが取り込まれた細胞を単離した。単離した細胞のゲノムDNAを精製し、マウスSINE配列を標的とするプライマーを用いて、PCR法によりゲノムに組み込まれたプラスミドDNAが検出されることを確認した。

This year, the DNA analysis of dendritic cells was carried out in patients with chronic dermatitis. The new and exotic genes are analyzed by the organization. Now, the research of gene introduction technology has been advanced, and certain conditions have been established for the purpose of gene introduction. The method of treatment for genetic disorders is to try to improve the quality of treatment. This is the first time that a virus has been introduced into the system. In one aspect, the method of gene introduction is to introduce the target gene into the target gene, and the position of the target gene into the target gene may affect the occurrence of the target gene. For example, if you want to know more, you can use the following methods to solve the problem: The analysis of the mechanism of foreign gene expression, the analysis of the characteristics of gene expression, the use of gene expression, the direct transfer of foreign gene expression into cells in vivo, and the implementation of the method of gene expression. This method is aimed at high efficiency gene introduction into liver cells and analysis of gene expression in liver cells. The expression of EGFP was detected in the cells. DNA purification, DNA sequencing, PCR and DNA sequencing