ガン発症におけるＲＵＮＸタンパク質の機能解析

RUNX蛋白在癌症发展中的功能分析

基本信息

批准号：
17J40101
负责人：
奥村(城尾) 晶子
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Kyushu University (2018-2019)Nagoya University (2017)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J40101/
关键词：
RUNXファミリーガン

项目摘要

RUNXファミリーはRUNTドメインを有する転写因子であり、ヒトではRUNX1、RUNX2、RUNX3から構成されている。RUNTドメインは特異的な塩基配列の認識やコファクターであるCBF betaとの結合に必須である。先行研究により、RUNXファミリーは個体の発生や細胞の腫瘍化に関与することが報告されている。RUNX1は血液幹細胞の産生および血球系分化に働き、変異体は血液腫瘍に関与している。RUNX2は骨芽細胞の骨分化を制御しており、骨肉腫、大腸ガン、乳ガンなどで高発現している。RUNX3は胃ガンにおいて抑制的に働くという報告がある。申請者はRUNX1の新規結合タンパク質としてAEBPを見出し、分子間結合、発現量の制御、活性への影響といった相互作用について興味深い知見を得た。また、RUNX2についてもAEBPとの分子間結合を確認すると共に、ヒト骨肉腫細胞を用いた過剰発現および発現抑制の実験系を立ち上げて、機能解析に取り組んだ。薬剤処理後のAEBPの活性および細胞応答について調べたところ、RUNX2とAEBPの間に興味深い相互作用が見出された。更に、RUNX2を過剰発現する細胞株を作成してRNAを精製し、マイクロアレイ法を用いて既知のAEBP関連因子の発現量への影響を調べると共に、細胞のガン化や分化に関連する遺伝子の網羅的な検索を行った。得られた候補遺伝子について、RT-qPCR法によるmRNAの定量解析を行い、結果が一致することを確認した。今後は、ウエスタンブロット解析、細胞免疫染色、フローサイトメトリーなどの実験手法を用いて、RUNX2がAEBPとの相互作用を通してどのように細胞のガン化や分化を誘導するのか、その詳しいメカニズムの解明を目指す。

Runx家族是带有Runt域的转录因子，在人类中，它由Runx1，Runx2和Runx3组成。 Runt结构域对于识别特定核苷酸序列以及与辅因子CBFββ的结合至关重要。先前的研究报告说，Runx家族参与了个体发育和细胞肿瘤发生。 Runx1在血液干细胞的产生和血细胞系统的分化中起作用，突变体参与血液学肿瘤。 RUNX2调节成骨细胞骨分化，并在骨肉瘤，结肠癌，乳腺癌等中高度表达。据报道，Runx3在胃癌中抑制了Runx3。申请人发现AEBP是Runx1的新型结合蛋白，并获得了对相互作用的有趣见解，例如分子间结合，表达水平的调节和对活性的影响。此外，我们还确认了用于RUNX2的分子间结合与AEBP的结合，并启动了使用人骨肉瘤细胞过表达和抑制表达的实验系统，并致力于功能分析。当研究药物治疗后AEBP的活性和细胞反应时，发现Runx2和AEBP之间存在有趣的相互作用。此外，创建过表达Runx2的细胞系以纯化RNA，并使用微阵列方法研究已知的AEBP相关因子对表达水平的影响，并对与细胞致癌和分化有关的基因进行了全面搜索。通过RT-QPCR方法定量分析所得的候选基因，并确认结果是一致的。将来，我们旨在通过使用蛋白质印迹分析，细胞免疫染色和流式细胞仪等实验方法与AEBP相互作用来阐明Runx2如何通过与AEBP的相互作用来诱导细胞癌变和分化的详细机制。

项目成果

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专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

HIF-2alphaによるフォン・ヒッペル・リンドウ病抑制因子B-Mybの安定化

HIF-2alpha 对 von Hippel-Lindau 疾病抑制因子 B-Myb 的稳定作用

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
奥村文彦;奥村晶子;中務邦雄;嘉村巧
通讯作者：
嘉村巧

Ubiquitin ligase SPSB4 diminishes cell repulsive responses mediated by EphB2.

DOI：
10.1091/mbc.e17-07-0450
发表时间：
2017-11-15
期刊：
Molecular biology of the cell
影响因子：
3.3
作者：
Okumura F;Joo-Okumura A;Obara K;Petersen A;Nishikimi A;Fukui Y;Nakatsukasa K;Kamura T
通讯作者：
Kamura T

University of California, San Diego(米国)

加州大学圣地亚哥分校（美国）