ＨＣＢ分解代謝系に関与する遺伝子群の同定および土壌中における挙動

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昨年度の研究実績を通じ、今後の研究の推進方策として①hcbA1およびhcbB3を有する細菌の環境中における分布の解析、②HCB脱塩素酵素の生化学的解析を抽出したが、そのうち当該年度では②の課題に於いて、異種間発現の宿主をRhodococcus erythropolis L88株としたことで、活性を有したHcbA1, HcbA2およびHcbA3の精製に成功し、in vitroでHCBからPCPへの脱塩素・水酸基付加反応を再構成することができた。興味深いことに、HcbA1はパートナーレダクターゼであるHcbA3に加え、HcbA2と共存することでより迅速にHCBを脱塩素した。一般的にtwo component-flavin diffusible monooxygenase (TC-FDM)では、flavin reductaseとflavin-dependent monooxygenaseの2コンポーネントで反応が触媒される。HcbA1とHcbA3もTC-FDMに分類されると考えられるが、3つ目のコンポーネントHcbA2が介在するという点から新規メカニズムの存在が示唆された。一方でHcbA1およびHcbA3の酵素反応速度パラメーターおよびHcbA2の役割については解明に至らなかった。また、当該年度では、PD653のPCP脱塩素酵素遺伝子hcbB3が誘導的であることを利用し、誘導基質でhcbB3を誘導したPD653を模擬PCP汚染土壌に混和することで、土壌中PCPの減少(減少率57±10.8%)を達成した。さらにPD653の基質特異性について調査し、Journal of Pesticide Scienceに投稿した。