発がん抵抗性遺伝子座Ｓｔｍｍ３の原因遺伝子の同定

负责肿瘤抗性位点Stmm3的基因的鉴定

• 批准号: 17J01656
• 负责人: 齋藤 慈
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J01656/
• 关键词: 皮膚発がん; p19Arf; 発がん抵抗性

本研究は、日本産野生由来近交系マウスMSM/Ms系統における発がん抵抗性遺伝子座Stmm3の原因遺伝子の同定および、候補遺伝子と考えられたp19Arfに存在する非同義置換多型の機能解明を目的とした。候補遺伝子として考えられたp19Arf はp16Ink4aとエクソンを共有しコ－ディングされている。そこで、CRISPR/Cas9により作製した16Ink4aノックアウトマウス、およびp19Arfノックアウトマウスを用い、DMBA/TPA多段階皮膚発がん実験を行い、原因遺伝子の同定を試みた。さらに、p19Arfノックアウトマウス（MSM/Ms系統およびFVB/N系統の遺伝的背景を持ったマウス）とp19Arf発現培養細胞（NIH/3T3細胞）を用いたin vitro解析を実施することで、p19Arfに存在する非同義置換多型の機能解析をより詳細に行った。また、ヒトアソシエーションスタディの結果と本研究の解析結果から得られた情報を統合することにより、ヒト発がん関連遺伝子の同定も試みた。発がん実験の結果、p19Arf MSMアレルノックアウトマウスはコントール群と比較し、良性腫瘍発生数が増加した。一方、p16Ink4a MSMアレルノックアウトマウスはコントール群と良性腫瘍発生数がほとんど変わらなかった。これらの結果から、p19Arf MSMアレルがより強い発がん抵抗性を示し、p19Arfが原因遺伝子の有力候補と考えられた。また、p19Arf発現培養細胞株を用いた解析から、TPA処理後において、FVB型p19Arf は細胞質に強く局在しているのに対し、MSM型p19Arf は核に強く局在し、MSM型p19Arf発現培養細胞の方がp53の発現レベルおよび標的遺伝子の発現レベルが増加していた。これらの結果から、p19Arf MSMアレルがp53経路の活性化を誘導し、皮膚腫瘍形成を抑制している可能性が考えられた。さらに、国内患者数万人規模のサンプルを用い、ヒトのがん発症との相関を調べた。その結果、ヒトCDKN2A周辺領域のSNPにおいて、乳がんおよび肺がん発症と相関することが示唆された。

The purpose of this study was to elucidate the function of nonsynonymous substitution polytypes existing in wild-derived inbred lines from Japan, including MSM/Ms system, resistance gene locus Stmm3, and genetic identity and candidate gene examination. The candidate's name is p19Arf. The candidate's name is p16Ink. CRISPR/Cas9 The p19 Arf gene (MSM/Ms system and FVB/N system) was used in vitro analysis of cultured cells (NIH/3T3 cells). The results of this study show that there is no correlation between the two. The number of benign tumors increased as a result of the development of the disease. One side, p16Ink4a MSM lost its color and number of benign tumors. P19 Arf MSM p19 Arm cells were analyzed in vitro, TPA treated, FVB type p19 Arm cells were strongly cytoplasmic, MSM type p19 Arm cells were strongly nuclear, and MSM type p19 Arm cells were strongly cytoplasmic. The results showed that the activation of p19Arf MSM was induced and the formation of skin lesions was inhibited. Today, tens of thousands of patients in the country are involved in the development of diseases. The results showed that SNPs in CDKN2A peripheral domain were related to breast cancer and lung cancer.

项目成果

A Polymorphic Variant in p19Arf Confers Resistance to Chemically Induced Skin Tumors by Activating the p53 Pathway

p19Arf 的多态性变体通过激活 p53 途径赋予对化学诱导的皮肤肿瘤的抵抗力

• DOI: 10.1016/j.jid.2018.12.027
• 发表时间: 2019
• 期刊: Journal of Investigative Dermatology
• 影响因子: 6.5
• 作者: Saito M;Okumura K;Isogai E;Araki K;Tanikawa C;Matsuda K;Kamijo T;Kominami R;Wakabayashi Y.
• 通讯作者: Wakabayashi Y.

がん抑制遺伝子p19Arfに存在する非同義置換多型の機能解析

抑癌基因p19Arf非同义取代多态性的功能分析

• 发表时间: 2018
• 作者: 齋藤慈;奧村和弘;磯貝恵理子;若林雄一
• 通讯作者: 若林雄一

順遺伝学的手法により明らかとなったマウス副甲状腺ホルモンの腫瘍抑制効果

正向遗传学方法揭示小鼠甲状旁腺激素的抑癌作用

• 发表时间: 2018
• 作者: 奧村和弘;齋藤慈;磯貝恵理子;三浦郁生;若菜茂晴;山口碧;設楽浩志;多屋長治;木南凌;若林雄一
• 通讯作者: 若林雄一

Parathyroid hormone suppresses skin-tumorigenesis by increasing intracellular calcium in keratinocytes

甲状旁腺激素通过增加角质细胞内的钙来抑制皮肤肿瘤的发生

• 发表时间: 2017
• 作者: Kazuhiro Okumura;Megumi Saito;Yasuhiro Yoshizawa;Haruka Munakata;Eriko Isogai;Ryo Kominami;Yuichi Wakabayashi
• 通讯作者: Yuichi Wakabayashi

副甲状腺ホルモンPTHの腫瘍増殖抑制効果

甲状旁腺激素PTH的肿瘤生长抑制作用

• 发表时间: 2018
• 作者: 奧村和弘;齋藤慈;磯貝恵理子;若林雄一
• 通讯作者: 若林雄一