出芽酵母の呼吸から発酵への移行期における膜輸送体不活性化の機構とその意義

酿酒酵母呼吸-发酵过程中膜转运蛋白失活的机制及意义

• 批准号: 17J02369
• 负责人: 藤田 翔貴
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J02369/
• 关键词: 出芽酵母; グルコース不活性化; 原形質膜輸送体; ミトコンドリア膜輸送体; モノカルボン酸輸送体

出芽酵母における外界環境中へのグルコースの流入による呼吸から発酵への移行による1) 原形質膜ピルビン酸輸送体（Jen1）と2) ミトコンドリアピルビン酸輸送体（MPC）の分解制御機構（グルコース不活性化）の解明を目指した。また、3) Jen1変異体発現株を用いて、呼吸から発酵への移行時にJen1が存在すると細胞内でどのような障害が生じるのか、全遺伝子発現レベルの点から検証した。1) 本年度は、前年度に引き続きJen1のユビキチン化制御に関しての解析結果をまとめ、学術雑誌に投稿した。2) MPCの輸送活性を左右するMpc2とMpc3は106アミノ酸残基まで非常に配列が類似しているため、細胞はそれ以降のアミノ酸配列を識別し、これらを選択的に分解していると考えた。そこで、Mpc2とMpc3の107番目以降のC末端領域を交換した変異体を作製し、炭素源による分解制御が逆転するか検証した。その結果、作製した変異体はそれぞれの野生型と同じ分解制御を受けたことから、両者の1-106アミノ酸中のわずかな違いが炭素源依存的な分解に重要であることが示唆された。3) 野生株と比較して、グルコース不活性化を受けないJen1変異体発現株では、ピルビン酸培養後にグルコースを添加した際、生育の回復に遅延が認められた。そこで、この時の野生株とJen1変異体発現株間の全遺伝子の発現量の違いをRNA-seqを実施することで比較し、この遅延の原因の一端を明らかにしようと試みた。その結果、変異体発現株では、ピルビン酸のアセトアルデヒドへの変換の強化し、アセトアルデヒドをエタノールへの変換とは別に、酢酸へ変換する経路を強化していることが予想された。すなわち、Jen1が分解されないことによる細胞内へのピルビン酸の過剰な蓄積を解消しようと、本来必要のない代謝を活性化していることが生育の悪化の要因の一つであると考えられた。

Saccharomyces cerevisiae is used in the external environment. In the external environment, there is a significant increase in the flow rate in the external environment. (1) the original membrane acid transporter (Jen1) 2) is responsible for the degradation of acid transporter (MPC). The decomposition mechanism (inactivation) is used to understand the target. 3) during the migration of yeast and respiratory enzymes in Jen1 cells, there was a mutation in the cells of Jen1 cells, which blocked the production of enzymes, and the whole cells were detected in the whole cell. 1) in the current year and the previous year, we will introduce the results of the analysis of the results of this year's and the previous year's Jen1 journal. 2) MPC sends the activity to the right and right of Mpc2, Mpc3, 106benzoyl acid residues, which is similar to the type of acid, cell temperature, and so on, in order to reduce the activity of the acid column, and the decomposition temperature of the selected one. The purpose of this paper is to reduce the C-terminal field and the decomposition of carbon sources in the field of C-terminal, Mpc2 and Mpc3 107. in order to reduce the content of carbon source, carbon source and carbon source. According to the results, the results show that the decomposition of the wild type is not affected by the decomposition of the wild type, and the importance of the decomposition of the carbon source in the acid. 3) the wild plants are more inactive than the wild plants, and the wild plants are not activated by the acid culture of the wild plants. 3) the wild plants are more inactive than the wild plants, and the wild plants are inactive. the wild plants are not activated by the acid culture and acid culture. The whole population of Jen1 plants can be measured in the whole plant, and the RNA-seq will be tested. The reason for the delay will be clear at one end. The results, the results and the results. The results of Jen1 analysis show that there is no significant change in the level of intracellular DNA in the cell. It is necessary to treat the disease by activating it. It is necessary to make it possible for the child to become pregnant.

项目成果

酵母の呼吸から発酵への転換期における細胞膜輸送体の分解機構を解明

阐明酵母从呼吸到发酵的转变过程中细胞膜转运蛋白的降解机制