抗加齢を目標としたヒト卵巣における新規酸化ストレス経路の解明

阐明人类卵巢中用于抗衰老的新型氧化应激途径

• 批准号: 17J02723
• 负责人: 秋野 なな
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J02723/
• 关键词: 抗酸化; 卵巣の加齢; フマル酸ジメチル

今年度は、Nrf2分解阻害剤であるフマル酸ジメチルの卵巣機能への影響を検討した。 ヒト体外受精の検体から分離した顆粒膜細胞にフマル酸ジメチルを添加し培養し、Nrf2やKeap1、抗酸化物質のDNAやタンパクレベルでの変化を定量的PCR法、ウェ スタンブロット法などによって検討した。また、過酸化水素の添加により酸化ストレスを受けた顆粒膜細胞と、フマル酸ジメチルを添加し細胞を酸化ストレスか ら保護した細胞に対して細胞蛍光免疫染色法を施し、酸化ストレスを可視化した。Nrf2に対するSiRNAを用いた実験でNrf2の機能を減弱させ、酸化ストレスや抗酸 化物質の定量も実施した。 以上の結果より、フマル酸ジメチルはヒト顆粒膜細胞に対し酸化ストレスへの保護作用をもつことが示された。またテロメア長やTERT活性にも着目し、定 量的PCR法、ウェスタンブロット法、卵巣の組織免疫染色法、ELISA法による検討を実施した。 さらに、昨年度は正常マウスならびに加齢マウスにフマル酸ジメチルを経口投与し、コントロール群と比較して卵巣組織切片における酸化ストレスレベルや卵胞 数の検討を開始した。加齢マウスはだいたい1歳齢を目安とし飼育し、フマル酸ジメチルの投与時期による違いや、飼育日数の違いによる卵巣機能の 変化に着目し、定量的PCR法、ウェスタンブロット法、卵巣組織免疫染色法を検討した。その結果、フマル酸ジメチルのマウスへの投与は卵巣の加齢を抑制することが示唆された。

This year, the effects of であるフ, nrf2-breaking antagonist であるフ, <s:1> acid ジメチ, <s:1> and <s:1> on the function of <s:1> oocyte, へ and <s:1> are affected by を検 and た. ヒ ト ivf の 検 body か ら separation し た granular cell membrane に フ マ ル acid ジ メ チ ル を add し し, Nrf2 や Keap1, resistance to acidic material の DNA や タ ン パ ク レ ベ ル で の - を quantitative PCR method and ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト method な ど に よ っ て beg し 検 た. ま た, acidic water element の add に よ り acidification ス ト レ ス を by け た particle と membrane cells, フ マ ル acid ジ メ チ ル を add し cells を acidification ス ト レ ス か ら protection し た cells に し seaborne て cell immune 蛍 light staining を し, acidification ス ト レ ス を visualization し た. Nrf2 に す seaborne る SiRNA を with い た be 験 で Nrf2 の function weakened を さ せ, acidification ス ト レ ス や acid chemical substances の quantitative も be applied し た. の above results よ り, フ マ ル acid ジ メ チ ル は ヒ ト granular cell membrane に し seaborne acidification ス ト レ ス へ の protection を も つ こ と が shown さ れ た. ま た テ ロ メ ア long や TERT activity に も し, fixed quantity and PCR method, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト method, eggs 巣 の immune staining, ELISA method に よ る を 検 please be applied し た. さ ら に, yesterday's annual は normal マ ウ ス な ら び に plus 齢 マ ウ ス に フ マ ル acid ジ メ チ ル を 経 mouth cast with し, コ ン ト ロ ー ル group と compare し て eggs 巣 biopsy に お け る acidification ス ト レ ス レ ベ ル や follicle number の を 検 please start し た. Add 齢 マ ウ ス は だ い た い 1 showed 齢 を mesh Ann と し rearing し, フ マ ル acid ジ メ チ ル の cast with period に よ る) い や, rearing stay の violations い に よ 巣 function の る eggs - the に し, quantitative PCR method, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト method, eggs 巣 organization immune staining を beg し 検 た. Youdaoplaceholder0 そ results, フ フ <s:1> acid ジメチ <s:1> ウスへ ウスへ administration of ウスへ oocyte <e:1> plus 齢を inhibition する する とが inhibition された.

项目成果

マウス卵巣におけるNrf2/Keap1経路による酸化ストレスの調節機能について

Nrf2/Keap1通路对小鼠卵巢氧化应激的调节

• 发表时间: 2017
• 作者: 秋野なな;平池修;磯野渉;本城晴紀;松浦宏美;谷川道洋;原田美由紀;甲賀かをり;織田克利;藤井知行;大須賀穣
• 通讯作者: 大須賀穣

マウス卵巣における Nrf2/Keap1 経路による酸化ストレスの調節と卵巣予備能への影響について

Nrf2/Keap1通路对小鼠卵巢氧化应激的调节及其对卵巢储备的影响

• 发表时间: 2018
• 作者: Akino Nana;Wada-Hiraike Osamu;Terao Hiromi;Honjoh Harunori;Isono Wataru;Fu Houju;Hirano Mana;Miyamoto Yuichiro;Tanikawa Michihiro;Harada Miyuki;Hirata Tetsuya;Hirota Yasushi;Koga Kaori;Oda Katsutoshi;Kawana Kei;Fujii Tomoyuki;Osuga Yutaka;秋野なな
• 通讯作者: 秋野なな

Activation of Nrf2 might reduce oxidative stress in human granulosa cells

• DOI: 10.1016/j.mce.2017.10.002
• 发表时间: 2018-07-15
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR ENDOCRINOLOGY
• 影响因子: 4.1
• 作者: Akino, Nana;Wada-Hiraike, Osamu;Osuga, Yutaka
• 通讯作者: Osuga, Yutaka

Activation of Nrf2/Keap1 pathway by oral Dimethylfumarate administration alleviates oxidative stress and age-associated infertility might be delayed in the mouse ovary

• DOI: 10.1186/s12958-019-0466-y
• 发表时间: 2019-02-13
• 期刊: REPRODUCTIVE BIOLOGY AND ENDOCRINOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Akino, Nana;Wada-Hiraike, Osamu;Osuga, Yutaka
• 通讯作者: Osuga, Yutaka