ゲノム編集法を用いたミツバチの社会性行動制御におけるmKastの機能解明
ゲノム編集法を用いたミツバチの社会性行動制御におけるmKastの機能解明
批准号:
17J03716
负责人:
河野 大輝
金额:
$1.98万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份:
2017
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
2017-04-26 至 2020-03-31
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英文摘要
ミツバチはモデル社会性動物としてその分子神経基盤が研究されてきた。中でも、昆虫脳の高次中枢であるキノコ体と社会性行動との関連が着目されている。キノコ体を構成するケニヨン細胞には、遺伝子発現プロファイルが異なるサブタイプが存在しており、その一部は採餌飛行時に活性化される。また、サブタイプの数は、ハチ目昆虫の行動の複雑化に伴い増加した可能性が指摘されている。これまでにサブタイプ選択的に発現する遺伝子群が見つかっているが、近年までミツバチでは有効な遺伝子操作法が存在せず、その社会性行動制御における機能は不明である。そこで本研究では、申請者が確立したミツバチにおけるゲノム編集法を用い、キノコ体において中間型ケニヨン細胞選択的に発現するmKastの機能を調べることを目的とした。これまでに、受精卵にゲノム編集を施し、孵化した幼虫を女王蜂へと分化させることでモザイク女王蜂(F0)を作出し、更にこれら女王蜂から変異雄蜂(F1)を作出した。さらに、変異雄蜂から採取した精子を用いて野生型女王蜂に人工授精を施し、ヘテロ変異体働き蜂(F2)の作出に成功した。また、変異雄蜂を用いた解析から、頭部におけるmKastタンパク質の発現は完全に欠失していること、それにも関わらず変異雄蜂には野生型と同数のケニヨン細胞サブタイプが存在していたことから、mKastは当初予想されていた中間型ケニヨン細胞の分化には機能していないことを示唆した。本研究成果の一部は、ミツバチにおける遺伝学の実証と、遺伝子機能解析を試みた初めての報告として、論文発表した。一方、これまでは受精卵への変異導入効率が低く、その後の継代が困難であった。そこでインジェクション法を改良したところ、F0世代で高効率にゲノム編集された個体を作出できたため、今後はこの手法を用いることで、ミツバチにおける遺伝子機能解析が簡便化されることが期待される。
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Possible roles and evolution of Kenyon cell subtypes in the brains of hymenopteran insects
膜翅目昆虫大脑中凯尼恩细胞亚型的可能作用和进化
DOI:
--
发表时间:
2018
期刊:
影响因子:
--
作者:
[Hiroki Kohno, Satoyo Oya, Takeo Kubo]
通讯作者:
Takeo Kubo
Development of gene manipulation methods towards functional analysis of genes in the honeybee
开发蜜蜂基因功能分析的基因操作方法
DOI:
--
发表时间:
2017
期刊:
影响因子:
--
作者:
[Hiroki Kohno, Takeo Kubo]
通讯作者:
Takeo Kubo
Development of essential techniques of CRISPR/Cas9 in the honeybee toward functional analysis of genes in honeybee social behaviors.
开发蜜蜂 CRISPR/Cas9 基本技术,对蜜蜂社会行为中的基因进行功能分析。
DOI:
--
发表时间:
2016
期刊:
影响因子:
--
作者:
[Kohno H, Suenami S, Takeuchi H, Sasaki T, Kubo T.]
通讯作者:
Kubo T.
Production of mKast mutatnt drones and heterozygote mutant workers by genome editing using CRISPR/Cas9
使用 CRISPR/Cas9 通过基因组编辑生产 mKast 突变雄蜂和杂合子突变工蜂
DOI:
--
发表时间:
2018
期刊:
影响因子:
--
作者:
[Hiroki Kohno, Takeo Kubo]
通讯作者:
Takeo Kubo
ミツバチにおける遺伝子操作法の開発による遺伝子機能解析の試み
尝试通过开发蜜蜂基因操作方法来分析基因功能
DOI:
--
发表时间:
2017
期刊:
影响因子:
--
作者:
[河野大輝, 久保健雄]
通讯作者:
久保健雄
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