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α，α－二置換アミノ酸を基質とする非リボソームペプチド合成酵素の探索と構造解析

以α,α-二取代氨基酸为底物的非核糖体肽合成酶的搜索和结构分析

基本信息

批准号：
17J09750
负责人：
曽根薫
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究においては、放線菌が生産する天然物JBIR-34, -35の生合成に関与する非リボソームペプチド合成酵素(NRPS)てであるFmoA3を主な研究材料として、その構造解析を行った。X線照射、SEC-MALS、およびSEC-SAXによる解析の結果、FmoA3はNRPSとしては前例のないhead-to-tail様式の二量体を形成していることが強く示唆された。特に、SEC-MALSによる解析では、溶液中のFmoA3の質量は理論値の2倍の大きさの値を示したことから、FmoA3が溶液中で二量体を形成する可能性が高いことが示された。このことは、FmoA3が放線菌の細胞内においても二量体として機能している可能性を示唆している。FmoA3がhead-to-tail様式の二量体を形成する目的としては、酵素の質量あたりの基質との接触頻度を高めることで触媒効率を高めることなどが考えられる。

In this study, we analyzed the structure of FmoA3, the main research material, which is related to the biosynthesis and non-release synthase (NRPS) of natural JBIR-34,-35. X-ray irradiation, SEC-MALS, SEC-SAX analysis results, FmoA3 NRPS and other examples of the head-to-tail model of the formation of two quantities, the middle and the opposite is strong. In particular, SEC-MALS analysis shows that the mass of FmoA3 in solution is twice as large as the theoretical value, and the possibility of FmoA3 formation in solution is high. The FmoA3 gene is responsible for the intracellular function of two molecules in actinomycetes. FmoA3 is a head-to-tail two-dimensional substance. The purpose is to improve the quality of the enzyme. The contact frequency is high. The catalytic efficiency is high.